[发明专利]一种水凝胶固定化漆酶‑介体酶促反应器有效
申请号: | 201410284026.3 | 申请日: | 2014-06-24 |
公开(公告)号: | CN104031904B | 公开(公告)日: | 2017-02-15 |
发明(设计)人: | 张淑娟;孙洪飞;阳花;傅博文;潘丙才 | 申请(专利权)人: | 南京大学 |
主分类号: | C12N11/08 | 分类号: | C12N11/08 |
代理公司: | 江苏圣典律师事务所32237 | 代理人: | 贺翔 |
地址: | 210093 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 凝胶 固定 化漆酶 介体酶促 反应器 | ||
1.一种水凝胶固化漆酶-介体酶促反应器,其特征在于,所述水凝胶固化漆酶-介体酶促反应器是通过以下步骤获得的:
a)将β-双酮溶于漆酶溶液A中,得到溶液C,溶液C中漆酶酶活为3~10 U/ml,β-双酮浓度为50~500 mM;
b)向三口烧瓶中加入烯类共聚单体、交联剂和漆酶总酶活不低于20U的溶液C,形成水凝胶前驱体溶液,所述水凝胶前驱体溶液中交联剂的质量为烯类共聚单体质量的3.0%-20.0%;
c)向三口烧瓶中通入惰性气体反应10-20min,后将三口烧瓶置于15℃~65℃恒温水浴30-90min,获得水凝胶;
d)将步骤c获得的水凝胶水洗4-8遍,置于-50℃ ~ -80℃冷冻干燥至恒重,即获得水凝胶固化漆酶-介体酶促反应器。
2.根据权利要求1所述水凝胶固化漆酶-介体酶促反应器,其特征在于,步骤a中所述漆酶溶液A是将漆酶溶于醋酸-醋酸钠缓冲溶液、或醋酸溶液、或磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲溶液、或磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液或纯水中的一种获得的。
3.根据权利要求2所述水凝胶固化漆酶-介体酶促反应器,其特征在于,步骤a中所述β-双酮为乙酰丙酮。
4.根据权利要求3所述水凝胶固化漆酶-介体酶促反应器,其特征在于,步骤b中,所述烯类共聚单体为丙烯酰胺,交联剂为N,N’-亚甲基双丙烯酰胺。
5.根据权利要求4所述水凝胶固化漆酶-介体酶促反应器,其特征在于,步骤c中,所述惰性气体为氮气或氩气。
6.根据权利要求1-5之一所述的水凝胶固化漆酶-介体酶促反应器,其特征在于,步骤b中,所述水凝胶前驱体溶液中还包括溶液B;
所述溶液B是将壳聚糖溶于乙酸溶液而获得壳聚糖浓度为5-25 g/L的溶液;
水凝胶前驱体溶液中烯类共聚单体与壳聚糖的质量比为30:1 ~ 3:1 ,交联剂的质量为烯类共聚单体和壳聚糖质量总和的3.0%-20.0%。
7.根据权利要求6所述水凝胶固化漆酶-介体酶促反应器,其特征在于,所述乙酸溶液浓度为0.5% ~ 1.0%。
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