[发明专利]一种胆木水溶性多糖及其制备方法与应用有效
申请号: | 201410284523.3 | 申请日: | 2014-06-20 |
公开(公告)号: | CN104017103A | 公开(公告)日: | 2014-09-03 |
发明(设计)人: | 蒲含林;李秀峰;赖潜 | 申请(专利权)人: | 海南制药厂有限公司 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00;A61P37/02;A61P29/00 |
代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人: | 苏运贞 |
地址: | 572200 海南省*** | 国省代码: | 海南;66 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 胆木 水溶性 多糖 及其 制备 方法 应用 | ||
技术领域
本发明涉及一种胆木中的大分子物质及其制备方法,特别涉及一种胆木水溶性多糖及其制备方法与应用。
背景技术
胆木是茜草科植物,胆木的药用部位是茎、枝、树皮和根部,胆木的水提物有清热解毒,消肿止痛的功效。
迄今为止,人们普遍认为,在胆木中发挥作用的是生物碱、酚酸等小分子物质。广州部队《常用中草药手册》中记载胆木的化学成分为“茎含黄酮甙、酚类”;《中华本草》中记载胆木的化学成分为胆木茎中主要含生物碱类和生物碱甙类,其中生物碱有:乌檀费新碱(naucleficine),乌檀费丁碱(mauclefidine),乌檀福林碱(nauclefline),1-乙酰基咔啉(1-acetyl-carboline),乌檀费林碱(nauclefiline)和乌檀醛碱(naucleidi-nal);生物碱甙有胆木碱庚(nauclecoside),胆木碱辛(naucle-cosidine)和长春花甙内酰胺(vincoside lactam);另外含有奎诺酸(quinov(a)ic acid)和β-谷甾醇(β-sitosterol)以及香草酸(vanillic acid)。
人们已经从中药胆木的茎、枝、叶和根等部位分离和鉴定了上百种小分子化学物质,对其中含量相对较多的吲哚类生物碱、生物碱糖苷和酚酸等进行了抑菌、抗炎和抗病毒试验。市面上销售的胆木中成药是胆木注射液和胆木浸膏片,胆木浸膏片由胆木水提取物加辅料制备而成,成分复杂,可以说包含了胆木中几乎所有成分;胆木注射液主要是胆木中的溶于水又溶于醇的小分子物质。
在获取生物碱、生物碱糖苷和酚酸等物质的过程中,通常将胆木中的大分子物质以药渣的形式丢弃。因此,胆木中的大分子物质,如多糖等的提取和功效均未见研究和报道。
发明内容
本发明的首要目的在于从胆木中发现和纯化出一种水溶性的大分子物质,提供一种胆木水溶性多糖的制备方法。
本发明的另一目的在于提供通过所述制备方法得到的胆木水溶性多糖。
本发明的再一目的在于提供所述的胆木水溶性多糖的应用。
本发明的目的通过下述技术方案实现:一种胆木水溶性多糖的制备方法,包括如下步骤:
(1)醇处理:将胆木药材粉碎,得到胆木碎屑;用醇或醇溶液处理胆木碎屑,接着固液分离,得到醇提取液和经过酒精处理的胆木;经过酒精处理的胆木已除去醇溶性的各类小分子物质和油脂类物质,便于后面的水提;
(2)水提取:将步骤(1)得到的经过酒精处理的胆木中的醇去除;接着加入水,加热提取;固液分离,得到水提取液和药渣;
(3)浓缩:将步骤(2)得到的水提取液进行浓缩,固液分离;得到溶液;
(4)醇沉:
①在步骤(3)得到的溶液中加入醇或醇溶液,得到体系I,体系I中醇的浓度为80~85%(w/w);接着固液分离,弃上清(含醇液体),取沉淀;用水溶解沉淀,得到水溶解液;
②重复步骤①至固液分离后的含醇液体几乎不显颜色,所得的沉淀即为胆木总多糖;
(5)透析:
使用截留分子量至少为5000Da的透析袋透析步骤(4)得到的胆木总多糖;得到含有胆木水溶性多糖的水溶液。
所述的胆木水溶性多糖的制备方法,还包含脱色的步骤,脱色的步骤位于步骤(4)醇沉和步骤(5)透析之间;
脱色的具体步骤如下:用水将胆木总多糖配制成饱和的胆木总多糖水溶液,将pH值调节至7.5~8.5,加入吸附剂或氧化剂,进行脱色;
所述的pH值优选为通过氨水调节;
所述的吸附剂优选为活性炭;其质量使用量优选为胆木总多糖质量的5~10%;
所述的氧化剂优选为过氧化氢;其质量使用量优选为胆木总多糖质量的5~10倍;
所述的脱色的温度优选为10~45℃;更优选为37~45℃;
所述的胆木水溶性多糖还可进一步纯化,步骤优选如下:将含有胆木水溶性多糖的水溶液浓缩、干燥;再用水将胆木水溶性多糖溶解成饱和水溶液,上样至凝胶柱,上样完后用水洗脱,硫酸-苯酚检测,收集含多糖的洗脱液,得到纯化后的胆木水溶性多糖;
所述的水优选为纯化水;
所述的浓缩的程度优选为浓缩至每克胆木水溶性多糖含15~20毫升水的溶液;必要时冷冻干燥保存;
所述的凝胶柱优选为葡聚糖凝胶柱或琼脂糖凝胶柱;更优选为sephadex G-150柱或Sepharose CL-6B;
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