[发明专利]一种1,3‑二油酸‑2‑棕榈酸甘油三酯的酶促酯交换制备方法

权利要求书

1.一种1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯的酶促酯交换制备方法，其特征在于，以猪油为原料，通过分离提取获得棕榈酸和油酸，利用脂肪酶催化棕榈酸和甘油合成棕榈酸甘油三酯，再利用固定化sn-1,3特异性脂肪酶催化棕榈酸甘油三酯和油酸合成1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油酸酯。

2.权利要求1所述方法，其特征在于，步骤如下：

1)棕榈酸和油酸的提取：以猪油为原料，先与碱和乙醇反应，在利用正己烷萃取获得脂肪酸混合液，再利用丙酮溶解低温储存后分离棕榈酸，再用乙腈溶解低温储存后分离提取油酸；

2)棕榈酸甘油三酯的合成：以脂肪酶为催化剂，催化步骤1)所得棕榈酸和甘油合成棕榈酸甘油三酯；

3)1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯的合成：以固定化sn-1,3特异性脂肪酶为催化剂催化步骤1)所得油酸和步骤2)所得棕榈酸甘油三酯合成1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯。

3.权利要求2所述方法，其特征在于，步骤1)所述碱为氢氧化钾，所述乙醇的浓度为95％，反应温度60℃，反应时间1h。

4.权利要求2所述方法，其特征在于，步骤1)所述丙酮，添加比例为40ml/g脂肪酸混合液，添加温度为40℃，所述低温为-18～-24℃，储存时间为24-30h。

5.权利要求2所述方法，其特征在于，步骤1)所述乙腈，添加比例为60ml/g不饱和脂肪酸，所述低温为-18～-24℃，储存时间为24-30h。

6.权利要求2所述方法，其特征在于，步骤2)所述脂肪酶为褶皱假丝酵母脂肪酶，所述合成棕榈甘油三酯，合成条件为甘油：棕榈酸＝1:4，脂肪酶添加量8％，反应时间4h，反应温度60℃。

7.权利要求2所述方法，其特征在于，步骤3)所述固定化sn-1,3特异性脂肪酶为米根霉sn-1,3特异性脂肪酶，所述合成1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯，合成条件为油酸和棕榈酸甘油三酯的比例为4：1，固定化米根霉sn-1,3特异性脂肪酶添加量7％，反应时间4h，反应温度60℃。

8.权利要求2所述方法，其特征在于，具体步骤如下：

1)取1g猪油，加入到含有0.23g KOH，2.64ml95％乙醇和0.44ml水的混合体系中，在60℃下水浴反应1h，在加入蒸馏水、正己烷，萃取获得水相，再用盐酸调节pH至1.0，再用正己烷萃取，得到油相，经氮气吹除溶剂后，得到脂肪酸混合液；

2)按40ml/g步骤1)所得的脂肪酸混合液的比例添加丙酮，在40℃下搅拌直到所有的脂肪酸溶解，冷却至室温后，在-24℃下储存24h，储存后在-24℃下过滤得到固相棕榈酸，氮吹液相后，得到不饱和脂肪酸；

3)按60ml/g步骤2)所得的不饱和脂肪酸的比例添加乙腈溶解不饱和脂肪酸，再在-24℃储存24h，储存后在-24℃下过滤氮吹，获得油酸；

4)将甘油和步骤2)所得棕榈酸以1：4的比例混合，添加8％的褶皱假丝酵母脂肪酶，60℃下反应4h后用丙酮溶解，离心分离去除酶和固体，获得棕榈酸甘油三酯；

5)取步骤3)所得油酸和步骤4)所得棕榈酸甘油三酯，按4：1的比例混合，添加7％固定化米根霉sn-1,3特异性脂肪酶，60℃下反应4h后，得到1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯。