[发明专利]具有抗体介导的光磁双模态介孔硅纳米颗粒的制备方法

权利要求书

1.具有抗体介导的光磁双模态介孔硅纳米颗粒的制备方法，其特征在于：该制备方法为：首先制备异硫氰酸荧光素修饰的3-氨丙基三乙氧基硅烷，再以氨水作为催化剂，在四氧化三铁纳米溶液中，加入四乙氧基硅烷和异硫氰酸荧光素修饰的3-氨丙基三乙氧基硅烷，反应得到具有双功能团的介孔二氧化硅纳米颗粒，再用3-氨丙基三乙氧基硅烷修饰氨基，进而为纳米颗粒修饰乳糖酸提供功能基团，交联乳糖酸以后，利用碳二亚胺盐酸盐和N-羟基硫代琥珀酰亚胺与乳糖酸的羧基形成半稳定的氨活性NHS酯，半稳定的氨活性NHS酯与前列腺干细胞抗原抗发生缩合反应形成酰胺键，实现抗体交联，得到主动靶向功能的双模态介孔硅纳米粒子。 

2.根据权利要求1所述的具有抗体介导的光磁双模态介孔硅纳米颗粒的制备方法，其特征在于：该方法具体包括以下步骤： 

(1)将0.01g～10g0.01mmol～10mmol的异硫氰酸荧光素和0.10g～10g0.1mmol～10mmol的3-氨丙基三乙氧基硅烷加入到10ml～100ml的乙醇中，在10℃～60℃下，避光通氮气0.1mol～5mol反应10h～28h，得到异硫氰酸荧光素修饰的3-氨丙基三乙氧基硅烷，记做FITC-APTES； 

(2)将柠檬酸保护的四氧化三铁纳米颗粒水溶液0.1ml～10ml0.001g/ml～10g/ml分散在40ml～130ml乙醇和水的混合液中，超声20min～120min，加入氨水0.1ml～10ml,浓度为0.1mol/l～20mol/l作为催化剂，在10℃～60℃下，剧烈搅拌10min～6.5h，搅拌速度为 60r/s,加入0.01ml～5ml的四乙氧基硅烷，在10℃～60℃下，反应2h～24h，加入步骤(1)合成的异硫氰酸荧光素修饰的3-氨丙基三乙氧基硅烷0.1ml～20ml，继续搅拌2h～24h，在1h～10h内逐滴加入0.01ml～10ml的四乙氧基硅烷，避光剧烈搅拌1h～10h，搅拌速度为60r/s,得到双功能团的纳米颗粒，记做FMNPs，用1ml～10ml的水做第一次离心洗涤，1ml～10ml的乙醇做第二次离心洗涤，1ml～10ml的水做第三次离心洗涤三次，干燥保存； 

(3)将0.01g～10g的双功能团的纳米颗粒FMNPs分散在40ml～130ml乙醇和水的混合液中，超声20min～120min使其充分溶解，在30min～5h内逐滴加完0.1ml～20ml的3-氨丙基三乙氧基硅烷，50℃～240℃下，剧烈搅拌1h～24h，搅拌速度60r/s，得到氨基修饰的FMNPs，用1ml～10ml的水做第一次离心洗涤，1ml～10ml的乙醇做第二次离心洗涤，1ml～10ml的水做第三次离心洗涤三次； 

(4)取0.1ml～10ml1mg/ml～10mg/ml的含半乳糖基的乳糖酸分子，在冰水浴下向其中加入0.1ml～10ml0.1mg/ml～10mg/ml的1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和0.1mL～10ml0.1mg/ml～10mg/ml N-羟基丁二酰亚胺，超声反应20min～2h，使乳糖酸的羧酸基团活化，然后将活化的乳糖酸溶液与步骤(3)制备的氨基修饰的FMNPs溶液混合，持续搅拌1h～19h，使乳糖酸活化的羧基与氨基修饰的FMNPs氨基结合，从而得到有乳糖酸修饰的氨基功能化FMNPs； 

(5)将0.10mg～10mg碳二亚胺盐酸盐和0.01mg～20mg N-羟基 硫代琥珀酰亚胺，混合在1ml～10ml的2-吗啉乙磺酸缓冲液中，缓冲液浓度为0.01mol/l～10mol/l，pH为4～9.5，最后加入1ml～50ml有乳糖酸修饰的氨基功能化FMNPs，在10℃～60℃避光搅拌20h～40h，搅拌速度60r/s；碳二亚胺盐酸盐和N-羟基硫代琥珀酰亚胺与乳糖酸的羧基形成半稳定的氨活性NHS酯，透析分离后加入到pH为4～8.5，浓度为0.001mol/l～10mol/l的1ml～50ml的磷酸盐缓冲液中，再加入0.1μl～100μl的10μg/ml～100μg/ml的前列腺干细胞抗原，在10℃～60℃避光反应4h～22h，半稳定的氨活性NHS酯与前列腺干细胞抗原抗体表面的氨基发生缩合反应形成酰胺键连接，从而实现抗体交联，得到表面修饰有抗体前列腺干细胞抗原的双功能介孔二氧化硅。 

3.根据权利要求2所述的具有抗体介导的光磁双模态介孔硅纳米颗粒的制备方法，其特征在于：所制备的异硫氰酸荧光素修饰的氨丙基三乙氧基硅烷保存在4℃下。