[发明专利]从雷公藤植物中分离提取雷公藤甲素的方法

权利要求书

1.一种从雷公藤植物中分离提取雷公藤甲素的方法，包括如下步骤：

1.溶剂浸提和碱处理

对雷公藤根、茎和/或叶净饮片用醇和水的混合液进行浸泡提取，得到浸提液；对该浸提液减压浓缩蒸去醇，得到浓缩液；向该浓缩液中加入1～5倍浓缩液体积的氯代烷烃溶剂，而后再加入碱，均匀混合后静置分层，得到水层和氯代烷烃层；

2.去除弱极性物质

将上述步骤1得到的氯代烷烃层液体减压浓缩至粘稠物，加入硅胶搅拌均匀，而后减压干燥，得到粉末状粗品；用非极性溶剂溶出该粉末状粗品中的弱极性物质，未溶物中加入甲醇、甲醇与水混合液或者丙酮，所得的溶出液浓缩至干，得到固体干燥物；

3.柱层析

对上述步骤2得到的固体干燥物进行硅胶柱层析，分离得到雷公藤甲素晶体，

其中，在所述步骤1溶剂浸提和碱处理中，所述碱以固体或其水溶液的形式加入，均匀混合后静置分层，所得到的水层与氯代烷烃层的体积比为0.8～1.2：1，同时水层中碱的浓度为0.08N～1.2N；

在步骤2去除弱极性物质中，向粘稠物中加入的硅胶为100～200目，硅胶与粘稠物的重量之比为0.5～2：1；所述非极性溶剂为正己烷或环己烷，用正己烷或环己烷对粉末状粗品反复冲洗至正己烷或环己烷洗出液颜色很淡几近无色；而后向未溶物中加入甲醇、甲醇与水混合液或者丙酮，该溶剂的加入量为每g粉末状粗品3～20ml。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征是，在所述步骤1溶剂浸提和碱处理中，所采用的雷公藤根、茎采用1～2mm直径×10～30mm长的块状，叶为洗净干燥后的叶片，且所述雷公藤根、茎、叶净饮片水分要求＜15wt％；

所述醇和水的混合液为甲醇和水或者乙醇和水的混合液；

所述饮片与醇和水的混合液的重量比为1：2～8；

在常温至醇和水的混合液沸点温度范围内的温度下浸泡2～12小时提取。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征是，在所述步骤1溶剂浸提和碱处理中，所述醇和水的混合液为乙醇和水的混合液，在醇和水的混合液中，醇和水按体积比1～9：1混合；

所述溶剂浸提采用微沸浸泡提取，且重复浸泡提取1～3次。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征是，在所述步骤1溶剂浸提和碱处理中，在醇和水的混合液中，醇和水按体积比8：1混合。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其特征是，在所述步骤1溶剂浸提和碱处理中，所述氯代烷烃溶剂为二氯乙烷、二氯甲烷或三氯甲烷；所述碱为氢氧化钠或氢氧化钾。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征是，在所述步骤1溶剂浸提和碱处理中，所述氯代烷烃溶剂为二氯乙烷或三氯甲烷；水层中碱的浓度为0.1N～0.8N。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征是，在所述步骤1溶剂浸提和碱处理中，还可以进一步包括对水层用所述氯代烷烃溶剂进行反萃取，且将该氯代烷烃溶剂萃取液并入氯代烷烃层中。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征是，在所述步骤3柱层析中，所述硅胶柱采用200～300目硅胶，并且采用湿法装柱；

采用体积比为1.5～1：1的环己烷-乙酸乙酯混合液为流动相进行洗脱；在柱层析过程中，采用TLC跟踪，Kedd试剂显色，收集并合并具有单一雷公藤甲素斑点的接收液，减压浓缩至小体积，置于冰箱冷藏，使析出晶体；析出后的晶体再用丙酮重结晶，过滤，减压干燥，得到无色针状雷公藤甲素晶体。