[发明专利]从天花粉中综合提取多种生物活性成分的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从天花粉中提取有效成分的方法，特别是涉及一种从天花粉中综合提取多种生物活性成分的方法。 

背景技术

天花粉中含有多种生物活性成分，如天花粉蛋白、多糖、皂苷、凝集素等。由于天花粉蛋白具有引产、抗肿瘤、抗病毒和抗HIV等作用；天花粉多糖具有降血糖、提高免疫力等活性。因而，目前对二者的研究较多，开发利用也比较深入，而对天花粉中其它生物活性成分的研究则较少。现有天花粉生物活性物质的提取方法主要以某种单一成分为主，如天花粉蛋白、天花粉多糖和天花粉凝集素。例如栝楼的块根（天花粉）中天花粉蛋白的含量较低使得天花粉蛋白的纯品价格非常昂贵。而在提取制备天花粉蛋白、多糖等单一成分时，天花粉中的其他生物活性成分则被白白丢失，这种提取方式不仅导致提取成本较高，且浪费了天花粉资源，迄今未见对天花粉中多种生物活性成分综合提取的相关报道。此外，目前提取的天花粉多糖主要集中在水溶性多糖方面，尚未检索到碱性多糖的提取及功能方面的研究。超声波辅助提取可以有效提高提取效率，缩短提取时间，节约成本，甚至还可以提高产品的质量和产量。所以广泛应用于油脂、蛋白、多糖、皂甙类、生物碱、蒽醌类、有机酸等的提取。因此，为了充分利用资源，研究开发一种从天花粉中综合提取多种生物活性成分的一套有效而廉价的分离技术非常必要。这将加速天花粉的工业化生产及利用，具有良好的社会价值及经济效益。 

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种从天花粉中综合提取多种生物活性成分的方法。利用本发明技术方案，可以从天花粉中综合提取醇溶物、水溶性多糖、碱溶性多糖、蛋白、凝集素和淀粉多种有效生物活性成分，更大程度地利用了天花粉资源，符合目前经济可持续发展。 

为了解决上述问题，本发明采用的技术方案是：           

本发明提供一种从天花粉中综合提取多种生物活性成分的方法，所述提取方法包括以下步骤：

a、醇溶物的提取：

首先在天花粉中加入5～10倍天花粉重量的乙醇，然后在20～25℃条件下超声波震荡5～10分钟，超声波处理后加热至80～90℃回流提取2～4小时，移出提取液；将移出的提取液进行抽滤，所得滤渣按照上面同样方法再提取一次，提取后移出提取液，提取液移出后再次进行抽滤，所得滤渣用于步骤b进一步提取；合并两次抽滤所得的滤液，将所得滤液进行减压浓缩，回收乙醇；当滤液浓缩至膏状后再次进行真空干燥，干燥至粉末状，得到粉状醇溶物；

b、天花粉水溶性多糖的提取：

将步骤a所得滤渣中加入滤渣质量3～6倍的蒸馏水，加热至50～70℃条件下搅拌提取2～3小时，移出提取液进行离心，离心后移出上清液；在移出上清液后所剩的沉淀物中加入沉淀物质量3～6倍的蒸馏水，加热至50～70℃条件下搅拌再次提取2～3小时，移出提取液，进行离心，离心后移出上清液；合并两次离心后得到的上清液，两次提取后所剩沉淀物用于步骤c进一步提取；将合并后上清液中加入无水乙醇至体积百分浓度为40～60%，静置收集沉淀物用于步骤c进一步提取，所得上清液进行旋转蒸发，浓缩至原上清液体积的1/6～1/8，所得浓缩液中加入质量百分浓度为20%的三氯乙酸，当三氯乙酸终浓度为8%时停止加入，然后搅拌30～60分钟，搅拌后在4℃条件下静置10～16小时，静置后离心，离心后所得沉淀物用于步骤c进一步提取，所得上清液中加入无水乙醇至体积百分浓度为70～80%，静置沉淀出的多糖用体积百分浓度为95%的乙醇进行洗涤，洗涤后进行真空干燥，干燥至粉末状，得到粉状天花粉水溶性粗多糖；

c、天花粉碱溶性多糖的提取：

收集步骤b得到的沉淀物，在收集的沉淀物中加入质量浓度为4%的氢氧化钠水溶液，所述沉淀物与氢氧化钠溶液二者之间的质量比为1：3～7，加热至55～65℃条件下提取30～50分钟，提取后移出提取液，进行离心，离心后移出上清液；移出上清液后的沉淀物按照同样的方法进行第二次提取，提取后移出提取液、离心分离，移出第二次上清液，同时得到所剩的沉淀物，该沉淀物用于步骤d进一步提取；合并两次所得上清液，在上清液中加入浓度为12mol/L浓盐酸中和至pH 值为7.0，接着进行离心，移出上清液，得到沉淀碱溶性多糖，用水洗涤所得碱溶性多糖3～5次，洗涤后进行真空干燥，干燥至粉末状，得到粉状碱溶性粗多糖；

d、天花粉蛋白的提取：