[发明专利]快速检测HLA-B*1502等位基因的引物、试剂盒及方法

权利要求书

1.一种快速检测HLA-B*1502基因的引物，其包含SEQ ID NO.1-4所示的检测引物EPF01、EPR01、EPF02和EPR02，所述四种引物分别组成引物组P1和P2，其中P1组为EPF01-EPR01-EPF02-EPR02，P2组为EPF01-EPR02-EPF02-EPR01。

2.根据权利要求1所述的引物，其进一步包含SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示的内对照引物NCXF和NCXR。

3.一种快速检测HLA-B*1502基因的试剂盒，其包含PCR反应混合液和Taq酶，所述PCR反应混合液分别包含权利要求1所述的引物组P1和P2，所述Taq酶的浓度优选为5U/μL。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其中快速检测HLA-B*1502基因的引物EPF01、EPR01、EPF02和EPR02的浓度均为0.5μM。

5.根据权利要求3或4所述的试剂盒，其中PCR反应混合液中进一步包含权利要求2所述的内对照引物。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其中内对照引物NCXF和NCXR的浓度均为0.2μM。

7.根据权利要求3至6任一项所述的试剂盒，其中PCR反应混合液中进一步包含dNTPs，染料和PCR缓冲液，染料优选为甲酚红。

8.根据权利要求7所述的试剂盒，其中dNTPs浓度为0.2mM，染料浓度为0.01％，PCR缓冲液组成为：Tris-HCL浓度10mM，氯化钾浓度50mM，氯化镁浓度1.5mM，明胶浓度0.001％。

9.一种快速检测HLA-B*1502基因的方法，其包含以下步骤：

(1)提取待检测样品的DNA溶液，

(2)采用权利要求1或2所述的引物，或采用权利要求3至8中任一项所述的试剂盒，以步骤(1)中提取的DNA溶液作为模板，进行PCR扩增；

(3)PCR扩增产物经电泳后，进行结果判读，当内对照条带和HLA-B*1502基因条带同时出现时，表明该基因为HLA-B*1502基因阳性，而只出现内对照条带时，则表明该基因为HLA-B*1502基因阴性。

10.权利要求1或2所述的引物，或者权利要求3至8中任一项所述的试剂盒在快速检测HLA-B*1502基因中的应用。