[发明专利]一种用液相色谱法分析重酒石酸卡巴拉汀有关物质的方法

说明书

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种液相色谱法分离分析重酒石酸卡巴拉汀及其有关物质的方法。

背景技术

重酒石酸卡巴拉汀是诺华公司开发的用于治疗中轻度阿尔茨海默病的药物，同时是治疗AD的一线药物。重酒石酸卡巴拉汀英文化学名为Ethylmethyl-carbamic Acid 3-[(1S)-1-(Dimethylamino)ethyl]phenyl Ester, Bitartrate，分子式为C₁₈H₂₈N₂O₈。重酒石酸卡巴拉汀结构式为：

                                                

在合成该化合物的过程中，有几步重要的中间体可能会由于去除杂质不完全而影响药物的纯度和质量。降解杂质是在药物生产或贮藏过程中产生的，无治疗作用且影响药物的稳定性和疗效，严重的甚至危害人体健康。对于重酒石酸卡巴拉汀的合成主要控制的有关物质有3个，分别是有关物质1：3-（1-Dimethylamino-ethyl）-phenol、有关物质2：Dimethyl-carbamic acid 3-(1-dimethylamino-ethyl)-phenyl ester、有关物质3：2,3-Bis-(4-methyl-benzoyloxy)-succinic acid，结构式分别为：

  

有关物质1                       有关物质2                            有关物质3

对于合成重酒石酸卡巴拉汀中引入的有关物质和贮藏过程中产生的降解杂质，不论是在原料药还是制剂中都是需要进行质量控制的，因此，实现重酒石酸卡巴拉汀及其有关物质的分离与分析，在重酒石酸卡巴拉汀的合成和制剂过程的质量控制方面具有重要的现实意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种分析重酒石酸卡巴拉汀的纯度以及分离其有关物质的方法，从而实现重酒石酸卡巴拉汀与其有关物质的分离和测定，保证重酒石酸卡巴拉汀及含重酒石酸卡巴拉汀制剂的质量控制。

本发明所述的用液相色谱法分析重酒石酸卡巴拉汀的纯度以及分离其有关物质的方法，是采用以辛烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以一定比例的无机盐缓冲溶液－有机相为流动相。

本发明所述的色谱柱选自品牌为Kromasil、Ultimate和Apollo的色谱柱，优选Apollo-C₈或Ultimate -C₈。

本发明所述的有机相选自以下化合物：甲醇、乙腈、丙醇、异丙醇、四氢呋喃等，优选为乙腈。

本发明所述的流动相无机盐缓冲溶液-有机相采用等度洗脱。

本发明所述的无机盐缓冲溶液中包含的无机盐选自磷酸盐、碳酸盐、柠檬酸盐，优选为磷酸盐，最优为磷酸二氢钠。

本发明所述的无机盐缓冲溶液中包含的无机盐的浓度为0.01～0.1mol/L，优选浓度为0.01mol/L。

本发明所述的分离分析方法，可按照以下方法实现：

1) 取重酒石酸卡巴拉汀或含重酒石酸卡巴拉汀的制剂样品适量，用流动相溶解样品，配制成每1mL含重酒石酸卡巴拉汀0.1～1.5mg，优选为0.5mg/mL的样品溶液。

2) 设置流动相流速为0.5～1.5mL/min ，优选为1.0mL/min，检测波长为200～250nm，优选为215nm，柱温箱温度为10～40℃，优选为25℃。

3) 取1)的样品溶液10～50μL，优选为10μL注入液相色谱仪，完成重酒石酸卡巴拉汀及其有关物质的分离与分析。

本发明所述的缓冲溶液最优pH值为3.0。

本发明使用的仪器与最优色谱条件为：

高效液相色谱仪的型号，无特别要求，本发明采用的色谱仪为岛津：LC-20ATvp，SPD-M20Avp

色谱柱：C₈（Kromasil，250×4.6 mm，5μm）

流动相：磷酸二氢钠缓冲液（称取1.56g NaH₂PO₄，2.16g辛烷磺酸钠，加水1000ml使溶解，磷酸溶液调节pH至3.0）-乙腈（75：25）

流速：1.0mL/min

检测波长：215nm。