[发明专利]以沙门氏菌菌毛为载体的HIV-1 10E8表位疫苗及其构建方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种表位疫苗，特别涉及用减毒Salmonella typhimurium ST14028-3b菌株的细聚合菌毛(thin aggregative fimbriae)为载体构建表达HIV-1 10E8表位的疫苗。本发明属于生物制药领域，

背景技术

HIV-1感染机体后能够刺激宿主细胞产生体液和细胞免疫应答，因此学术界普遍认为，有效预防HIV-1感染的疫苗必须同时具备诱导机体产生病毒特异性的体液免疫和细胞免疫的双重能力。而事实上，虽然HIV疫苗的研究由来已久，但随着研究的深入，人们发现要研制具备上述特性的理想疫苗还面临着许多困难(Smith KA.The HIV vaccine saga.Med Immunol.2003；2(1):1.)：其中最关键的问题是HIV病毒变异性高。HIV基因变异速度快，在病毒感染过程中抗体中和表位和CTL表位的变异使病毒快速逃避机体免疫系统的监视，导致疫苗的效力降低，所以如何在快速变异的病毒分子中筛选出能够诱导广泛中和抗体的保守性抗原是开发疫苗的关键。为解决这个问题，近年来以保守的包膜主要中和表位(principle neutralizingdeterminants,PND)为基础的表位疫苗应运而生。研究结果表明，表位多肽疫苗能够诱导机体产生针对不同HIV-1毒株的广谱中和抗体，是一种很有前途的疫苗形式。由于大多中和表位仅由几个或几十个氨基酸组成，免疫原性较差，因此如何提高表位的免疫原性并能诱导能够中和多个HIV-1分离株抗体反应的表位疫苗是目前研究的重点。

HIV-1保守的广谱中和表位主要集中在跨膜蛋白gp41的近膜端胞外区(MPER)，MPER主要含有3个构象依赖性抗原决定簇(aa579-604,aa619-648,aa644-663)，含有2F5、4E10和Z13三个具有广谱中和活性的抗原表位。虽然从病人体内分离出的抗体可以中和高度多样化的HIV-1分离株，但研究表明以这3个表位研制的疫苗却很难诱生出具有广谱中和活性的中和抗体(BNabs)反应。2012年Huang等发现了一个HIV-1 gp41近膜端胞外区(MPER)特异性抗体，命名为10E8，该抗体可中和～98％的实验病毒(Huang J,Ofek G,Laub L,et al.Broad and potent neutralization of HIV-1 by a gp41-specific human antibody[J].Nature,2012)。10E8是目前报道的最广谱、最强的中和抗体之一。与以往MPER抗体相比，10E8更易接近原代病毒Env的MPER区。以往MPER抗体的脂质结合性和自身反应性是其显著特征，也是疫苗诱导此类抗体的重要阻碍。然而，10E8缺乏这些特征。另外，文章报道的慢性感染队列中，具有相似特异性的抗体并不罕见。这表明10E8样抗体并没有通过自身反应性筛选而从抗体系统中被删除。这些结果进一步提示，如果设计疫苗诱生这些抗体，接种未感染HIV的人群后可能在大多数人体中产生10E8样抗体。所以10E8表位可能是HIV表位疫苗不可或缺的表位之一。但对于表位疫苗而言可能不仅需要天然10E8表位的呈递，还需要运用一个载体平台，使其具有足够的免疫原性去引导10E8样抗体进化。