[发明专利]金雀花花蕾中鼠李素-3-O-β-D-芸香糖的提取分离方法

说明书

技术领域

本发明涉及天然资源深加工领域，更具体的涉及一种从金雀花花蕾中提取分离鼠李素-3-O-β-D-芸香糖的方法。 

背景技术

金雀花（Caragana sinica）为豆科锦鸡儿属（Caragana）落叶灌木，别名锦鸡儿、黄雀花、阳雀花、生血草。金雀花分布于我国长江流域及华北地区的丘陵、山区的向阳坡地，我国产40余种，资源较为丰富。在云南，冬尽春来，金雀花遍开山野。其貌不出众，香气独具。人们将它与鸡蛋、腊肉、火腿和鲜肉等爆炒，或者与肉片和豆腐一起煮成三鲜汤，香甜可口。民谚曰：“吃了金雀花，眼睛不眨巴”。张小玲等人（2004）和樊建等人（2006）报道金雀花花蕾具有丰富的营养价值，它的蛋白质、脂肪和碳水化合物含量高于几种豆科植物的蔬菜（如黄豆芽、绿豆芽、扁豆、刚豆、菜豆），其微量元素如Fe、Zn、Se和Vc的含量高于人们常见的蔬菜，另外它含有17种人体必须的氨基酸。 

   金雀花一身都是宝，其根部具有较好的功效，《植物各实图考》和《上海常用中草药》记载金雀花根滋补强壮，活血调经，祛风利湿。用于高血压病，头昏头晕，耳鸣眼花，体弱乏力，月经不调，白带，乳汁不足，风湿关节痛，跌打损伤。胡昌奇等人从根部分离得到甾醇类、黄酮类、聚苯二烯类和苷类等化合物，报道了一系列新颖的聚苯二烯类化合物及它们抗炎和提高免疫力活性，同时他们还研究了金雀花根部提取物的相关活性，发现它可降低实验家兔的全血粘度、全血还原粘度、血浆粘度，降低纤维蛋白原含量，缩短血小板电泳时间，抑制血小板粘附，改善血液的浓、粘、凝和聚状态，抑制蛋白激酶C活性及癌细胞生长活性，还具有较强刺激成骨细胞增殖的活性。 

《上海常用中草药》记载金雀花花蕾具有活血祛风，止咳，强壮的功效，能用来治疗头晕头痛、耳鸣眼花、肺虚久咳、小儿疳积等疾病。在云南，金雀花花蕾的资源开发情况不容乐观，仅有少量花蕾在其花期被采摘作为菜肴食用或被作为中药原料，而大量花或落地后无人处理，或枯萎后自然失去效用，导致这种天然花卉资源白白浪费。太志刚等人（2010）对云南大理产的金雀花花蕾化学成分和相关活性进行了研究，从中分离得到23个化合物，包括10个黄酮类化合物，8个三萜类化合物，2个甾体类化合物及3个酚酸类化合物，并发现金雀花具有较强的抗氧化活性，通过金雀花HPLC含量测定，发现异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖在金雀花中的含量高达3.94 mg/g。1999年Hideyuki等人报道了异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖具有抗氧化、抗肿瘤、抑制EB 病毒早期抗原活性等多种生物活性。2009年阿吉艾克拜尔·艾萨通过“骆驼刺质量标准”的起草工作，发现异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷是骆驼刺的主要化学成分和标志性成分，初步的药理实验研究表明鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷是骆驼刺的主要有效成分之一，其自身可通过抑制α-淀粉酶降低血糖，并能抑制淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒。 

基于以上，提取异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖具有较为实际意义。然而迄今为止，对异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖提取方法的报道较少，至今仅有李坤平等人（2011）采用大孔吸附树脂富集布渣叶中的总黄酮，用Sephadex LH-20 凝胶柱从总黄酮中分离制备纯度大于98 %的异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷对照品，方法简便有效，但该方法关键步骤中利用凝胶材料进行纯化，而凝胶存在着市场价格较高，处理量较小的问题，从而导致异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖的产量低，不易扩大化生产。 

发明内容

为了开发云南金雀花资源，旨在克服之前提取方法中存在的技术问题，本发明提供了一种提取率高，设备要求低，适合产业化的金雀花花蕾中异鼠李-3-O-β-D-芸香糖的提取分离方法。 

本发明的目的是通过以下具体技术方案实现的： 

1、粉碎和提取

取干燥的金雀花花蕾，粉碎至粒径为1.0~2.0mm，加入金雀花花蕾质量10~15倍的乙醇溶液，回流提取两次，每次1~1.5小时，提取液趁热抽提浓缩，得提取物粗样；

2、萃取、分离和纯化