[发明专利]一株少动鞘氨醇单胞菌菌株gxas-815及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物工程技术领域，具体是一株少动鞘氨醇单胞菌菌株gxas-815，从广西南宁采集样品筛选获得，该菌株应用于以蔗糖为原料发酵生产结冷胶。 

背景技术

结冷胶是一种新型微生物胞外多糖，是由D-葡萄糖、D-葡萄糖醛酸、D-葡萄糖及L-鼠李糖或甘露聚糖4种糖单元构成的高分子聚合物。结冷胶用途非常广泛，在食品领域主要用作增稠剂，是目前国际上集增稠、悬浮、乳化、稳定于一体，性能优越的食品胶之一。作为新型的微生物胶，在食品、医药、化工等行业，结冷胶将逐步取代植物胶，如琼脂、卡拉胶等，具有良好的市场前景。(魏春，张栋慧，应向贤等.产结冷胶的黄色素缺陷型抗药性鞘氨醇单胞菌WZ013发酵条件优化.中国食品学报.2013,23(2):101-107)。结冷胶对酶稳定，是絮凝效果好、易自然降解、不会引起二次污染等特点的新型絮凝剂。 

少动鞘氨醇单胞菌又译名少动鞘脂单胞菌，是结冷胶的发酵生产菌株。在污水处理的活性污泥中曾多次分离出少动鞘氨醇单胞菌，其具有絮凝活性，生产的结冷胶能溶于冷水，有良好的稳定性，耐酸、耐高温，热可逆等特性，还能抵抗微生物及酶的作用，能作为生物絮凝剂的组成部分行使废水处理等生物修复功能。国内结冷胶生产厂家的生产规模小、生产的结冷胶规格较少，工业化生产中依然存在发酵产率低，发酵过程中通气搅拌能耗高，产物提取繁琐，产品澄清困难等问题，直接导致生产成本较高，限制了国内结冷胶行业的发展。在微生物多糖的发酵过程中，选择合适的发酵条件是极其重要的。结冷胶是由少动鞘氨醇单胞菌在适宜的培养基中经糖代谢合成，在合成过程中，糖类为主的碳源、蛋白质为主的氮源构成发酵原料成本的最大部分(胡桂萍，刘波，朱育菁等.少动鞘脂单胞菌产结冷胶发酵培养基的响应面法优化.生物数学学报.2012,27(3):507-517)。 

少动鞘氨醇单胞菌是一种好氧革兰氏阴性杆菌,能在以葡萄糖、淀粉、蔗糖等作碳源,硝酸铵、酵母膏、蛋白胨等为氮源以及含其他微量元素的培养基中生长并产胶。国内外众多学 者的研究发现，碳源、氮源、种龄、接种量、温度、发酵培养基初始pH都对其发酵产结冷胶有较大的影响。 

以少动鞘氨醇单胞菌或者少动鞘脂单胞菌为检索要素，在中国知识产权局共检索到44项专利。这些专利涉及范围主要有：少动鞘氨醇单胞菌新菌株的发现、基因的发掘和基因敲除重组菌构建、相关酶制剂的生产、发酵产结冷胶的生产方法和提取方法、作为微生物添加剂用于食品风味改善和废水处理等应用。 

发明内容

本发明的目的是提供一株少动鞘氨醇单胞菌菌株及其应用。这个菌株具有良好的发酵优化和遗传改造前景，同时也具有重要的工业应用价值。 

本发明所提供的少动鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas paucimobilis)gxas-815是从广西南宁采样分离筛选得到的。 

所述少动鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas paucimobilis)gxas-815CCTCC M2013327分离筛选方法： 

a)采样：从广西南宁采集样品， 

b)富集：每个样品各称取1g置于以蔗糖为主要碳源的培养基中，置于220r/min摇床30℃发酵72h，取粘度高的发酵醪进行初筛， 

c)初筛：将粘度高的发酵醪稀释涂布筛选平板培养基，置于30℃培养箱中培养24h，从平板上挑选黄色、圆形、光滑、有光泽、低凸起、边缘整齐的菌落进行复筛， 

d)复筛：从筛选平板上挑选单菌落于蔗糖发酵培养基中，置于220r/min摇床30℃发酵72h，发酵醪80℃水浴30min、离心去菌体、乙醇沉淀、烘干、经傅立叶变换红外光谱仪Nicoletis10(Thermo)检测，筛选结冷胶产量较高的菌株进行优化， 

e)鉴定：经生化自动鉴定仪和16S rDNA鉴定本菌株为少动鞘氨醇单胞菌(Sphingomonaspaucimobilis)。 

本发明的少动鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas paucimobilis)gxas-815，可用于发酵生产结冷胶。 

所述发酵生产结冷胶的具体方法是：将少动鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas paucimobilis)gxas-815接种到发酵培养基中，置于220r/min摇床，发酵温度为30℃，发酵72h得到结冷胶发酵醪。