[发明专利]一种喜来越橘组织培养增殖培养基及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物组培快繁技术领域，主要是一种适宜喜来越橘组培苗增殖的培养基。

背景技术

越橘是杜鹃花科(Ericaceae)越橘属(Vaccinium)灌木类小浆果果树。其果实为蓝色或红色，酸甜适中，果实低能量且含有多种抗氧化成份，具有极高的营养价值和医疗保健作用。越橘果实内的生物活性物质具有明目、消除眼睛疲劳、增强视力的功能。目前，全国各地的科研单位及企业开展了大量蓝毒组培快繁方面的研究，能够迅速的推广新优品种成为蓝莓苗的主要育苗手段。由于蓝莓品种较多，所适用的增殖培养基也不尽相同，目前很多工厂化生产所采用的都是统一的培养基配方，针对性不强，导致不同品种快繁速度不同，大大影响了蓝莓的工厂化生产，从而增加了生产成本。喜来是越橘的一个品种，适应性广，是北方地区的主栽品种，通常采用组织培养的方法进行快速繁殖。但由于采用现有的常规组培快繁技术，喜来增殖倍数低，生长速度慢，影响了喜来越橘的快速发展，优化喜来越橘培养基配方显得极其重要。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种既能提高喜来越橘的增殖倍数，又能缩短增殖周期，且增殖苗生长健壮的喜来越橘增殖的培养基配方。

为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案为：一种喜来越橘组织培养的增殖培养基，包括如下组分：改良WPM培养基+ NAA(萘乙酸)0.5 mg/L+GA （赤霉素）0.2 mg/L+玉米素（ZT）2-3mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂7 g·L^-1，pH为5.2。

上述改良WPM基本培养基包括如下组分：

大量元素：893mg·L^-1硝酸钾、119 mg·L^-1硫酸铵、370 mg·L^-1硫酸镁、96 mg·L^-1四水合硝酸钙、 170mg磷酸二氢钾；

微量元素：22.3 mg·L^-1硫酸锰、8.6 mg·L^-1硫酸锌、0.025 mg·L^-1硫酸铜、0.25mg·L^-1钼酸钠、6.2 mg·L^-1硼酸；

铁盐：74.6mg·L^-1乙二胺四乙酸二钠、55.6 mg·L^-1硫酸亚铁；

有机物：0.5 mg·L^-1烟酸、0.5 mg·L^-1盐酸硫胺素、0.5 mg·L^-1盐酸毗哆醇、l00 mg·L^-1肌醇、2 mg·L^-1甘氨酸。

上述喜来越橘组织培养的增殖培养基的制备方法，该方法包括如下步骤： 

（1）配制改良WPM培养基：

 (11)50倍大量元素母液的配制：分别称取44.65g硝酸钾、5.95g硫酸铵、18.5g硫酸镁、然后用蒸馏水溶解后定容至1000ml，配成母液Ⅰ；

称取13.9g四水合硝酸钙，用蒸馏水溶解后定容至1000ml，配成母液Ⅱ；

称取8.5g磷酸二氢钾，用蒸馏水溶解后定容至1000ml，配成母液Ⅲ；

使用时配制每升增殖培养基取母液Ⅰ，母液Ⅱ，母液Ⅲ各20ml；

(12)250倍的微量元素母液的配制：称取5.575g硫酸锰，2.15g硫酸锌，0.00625g硫酸铜，0.0625g钼酸钠，1.55g硼酸，0.10375 g碘化钾，用蒸馏水溶解后定容至1000ml，配成母液Ⅳ，使用时配制每升增殖培养基取4ml母液Ⅳ；

(13)100倍的EDTA-铁盐母液的配制：称取乙二胺四乙酸二钠，7.46g；硫酸亚铁5.56g，分别溶解，混合定容至1000mL，配成母液Ⅴ，使用时配制每升增殖培养基取10ml母液Ⅴ；

(14)100倍的有机成分母液的配制：称取0.2g甘氨酸，0.005g盐酸硫胺素，0.005g盐酸吡哆醇，0.005g烟酸，10g肌醇，用蒸馏水溶解后混合定容至1000ml，配成母液Ⅵ，使用时配制每升增殖培养基取10ml母液Ⅵ；