[发明专利]蛋白质等电聚焦电泳的装置

说明书

本申请为申请号：CN201310113855.0，发明名称：蛋白质等电聚焦电泳的方法及其装置，申请人：上海交通大学，申请日2013年4月2日的中国发明专利申请的分案。

技术领域

本发明涉及的是电化学方法分析材料技术领域的方法和装置，具体是基于移动反应界面(moving reaction boundary，MRB)的蛋白质等电聚焦电泳(isoelectric focusing，IEF)装置。

背景技术

IEF技术为蛋白质高效分离技术，其原理是利用两性电解质在凝胶中创造一个pH梯度，同时利用蛋白质具有两性解离和等电点的特点，对蛋白质进行分离分析(P.G.Rightti,In:T.S.Work and R.H.Rurdon,Laboraotary Techniques in Biochemistry and Molecular Bioboligy,Elsevier Biomedical Press,Amesterdam New York Oxford,v II,1983,p.1-86,268-313)。IEF具有分离效率高、分离富集同时完成、上样模式多样等优点。IEF技术应用广泛，它不仅是蛋白质pI表征和纯度鉴定的标准分析技术(O.Vesterberg,Acta Chem.Scand.1969,23,2653)；同时也是复杂蛋白质及其组学研究中的关键分离技术(S.Nilesh,E.Scott,Nature Protocols,2006,1,1732)，在双向凝胶电泳中总是作为第一向分离技术(P.H.O'Farrell,J.Biol.Chem.1975,250,4007；A.D.Rolland,B.Evrard,N.Guitton,J.Proteome Res.2007,6,683)。

基于常规凝胶电泳的IEF技术主要二种，包括：(i)、管式凝胶IEF技术(L.E.M.Miles,G.E.Simmons,A.Chrambach,Anal.Biochem.1972,49,109)；(ii)、薄层凝胶IEF技术(P.G.Rightti,In:T.S.Work and R.H.Rurdon,Laboraotary Techniques in Biochemistry and Molecular Bioboligy,Elsevier Biomedical Press,Amesterdam New York Oxford,v II,1983,p.1-86,268-313)。但在这两种凝胶IEF电泳技术中始终存在pH梯度漂移(drifting of pH gradient,H.Rilbe,In:Electrofocusing and Isotachophoresis(Editors:B.J.Radola and D.Graeslin),Walter de Gruyter&Co.,Berlin New York,1977,p35-50)和水平化(plateau of pH gradient,P.Arosio,E.Grana and P.G.Righetti,J.Chromatogr.1978,166,55)现象造成的不稳定性。并且在双向凝胶电泳(two dimensional gel electrophoresis,2DE)中，由于管式和薄层凝胶IEF的凝胶很难取出，取出后也很难完整的进行后续的转移操作；因此，基于常规凝胶电泳的第一向IEF分离技术很难与第二向的SDS-PAGE电泳兼容。