[发明专利]一种快速提取测定土壤低分子量有机酸的ASE-HPLC方法

权利要求书

1.一种快速提取测定土壤低分子量有机酸的ASE-HPLC方法，其特征在于包括以下步骤：

1)准确称取过12目筛子的连作果园鲜土样1-20g，用20-30g石英砂混匀，将混合均匀的样品装入萃取池中，按以下条件萃取：以浓度为0.2％的磷酸溶液为萃取溶剂，压力10.3Mpa，温度60℃，静态萃取时间6min，冲洗体积60％，吹扫时间200s，静态循环2次；萃取完成后将萃取液在40℃条件下用旋转蒸发仪蒸干，用2ml浓度为0.2％的磷酸溶液将蒸干后的萃取液溶解后离心；离心后上清液上高效液相色谱仪进行测定得到土壤样品中每种有机酸谱图；

2)有机酸标样的配制：使用超纯水分别配制草酸、酒石酸、苹果酸、乳酸、柠檬酸、乙酸和琥珀酸7种有机酸标准品溶液，有机酸标准品溶液的浓度分别为：草酸：51.8mg/ml、酒石酸：301.5mg/ml、苹果酸：104.9mg/ml、乳酸：108.5mg/ml、柠檬酸：309.7mg/ml、乙酸：173.4mg/ml和琥珀酸：108.6mg/ml，将有机酸标准品上高效液相色谱仪分别得到每种有机酸标准样品谱图；

3)步骤1)和步骤2)中色谱条件为：色谱柱：Symmetry C₁₈(5μm，250mm×4.6mm)，柱温30℃，流动相A：10mmol/l的磷酸二氢铵；流动相B：甲醇；流动相A：流动相B体积比＝98：2，二者混合液用浓磷酸调节pH值至2.4-2.5，流速：0.9ml·min^-1；自动进样，进样量10μl；检测波长：210nm；

4)采用外标法计算待检土壤中有机酸的含量。