[发明专利]PRL-1基因在制备诊断和/或治疗肝癌产品中的应用

说明书

技术领域

本发明属于生物技术和医学领域，具体涉及一种PRL-1基因在制备诊断和/或治疗肝癌产品中的应用。

背景技术

肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma，HCC)是世界第五大肿瘤，在癌症相关死因顺位中占第三位。超过75％的肝细胞癌病人在术后5年内复发和/或转移，成为这部分病人死亡的主要原因。可逆性的蛋白酪氨酸磷酸化对于调节各种信号通路(包括参与肿瘤细胞粘附、侵袭和转移的信号通路)非常关键，它的平衡由蛋白酪氨酸激酶(PTKs)和蛋白酪氨酸磷酸酶(PTPs)两大家族调控。与PTKs大家族相比，PTPs超家族还未得到广泛研究。PTPs的肝再生磷酸酶(PRLs)亚家族是一类独特的法尼基化磷酸酶，因其成员PRL-3在结直肠癌转移灶中高表达而受到广泛关注。

在PRLs亚家族成员中，PRL-3研究得最为透彻，且其表达升高与多种肿瘤(包括结直肠癌、乳腺癌、胃癌)的进展和转移相关。PRL-3有望成为潜在的肿瘤预后标志物和治疗靶点。与PRL-3对比，PRLs的另外两个成员，PRL-1(又名PTP4a1)和PRL-2研究得较少。尽管PRL-1磷酸酶最先在再生肝组织中被发现，然而其在肿瘤细胞尤其是肝癌细胞中的功能及其机制仍十分不清楚。

发明内容

本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点和不足，提供一种PRL-1基因在制备诊断肝癌产品中的应用。

本发明的另一目的在于提供上述基因在制备治疗肝癌产品中的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种PRL-1基因在制备诊断肝癌产品中的应用，所述的诊断肝癌产品包括：通过RT-PCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交或基因芯片诊断肝癌的产品；

所述的通过RT-PCR诊断肝癌的产品包括至少一对特异扩增PRL-1基因的引物；

所述的特异扩增PRL-1基因的引物优选为引物PRL-1-CDS-F和引物PRL-1-CDS-R：

引物PRL-1-CDS-F：

5’-GGAAGATCTGCCAACATGTACCCATACGATGTTCCAGATTACGCTATGGCTCGAATGAACCGC-3’；

引物PRL-1-CDS-R：

5’-CGGCTCGAGTTATTGAATGCAACAGTTGTTTCTATGAC-3’；

所述的通过实时定量PCR诊断肝癌的产品包括至少一对特异扩增PRL-1基因的引物；

所述的特异扩增PRL-1基因的引物优选为引物PRL-1-F和引物PRL-1-R：

引物PRL-1-F：5’-ACCAATGCGACCTTAAACAAA-3’；

引物PRL-1-R：5’-AATCTGGTTGGATGGTGGTG-3’；

所述的通过免疫检测诊断肝癌的产品包括：与PRL-1蛋白特异性结合的抗体，包括多克隆抗体和单克隆抗体；

所述的通过原位杂交诊断肝癌的产品包括：与PRL-1基因的核酸序列杂交的探针；

所述的通过基因芯片诊断肝癌的产品包括：与PRL-1基因的核酸序列杂交的探针；

在本发明中，可以使用一系列本领域已知的方法来制备针对PRL-1蛋白特异的抗体。例如，将提纯的人PRL-1基因产物或它的抗原片段注射入动物体内以产生多克隆抗体。同样，表达人PRL-1蛋白或它的抗原片段的细胞也可以用来对动物致免疫而产生抗体。根据本发明制备的抗体也可以是单克隆抗体，这些单克隆抗体可用杂交瘤技术制备(例如，Kohler et al.，Nature256：495，1975；Kohler et al.，Eur.J.Immunol.6：511，1976；Kohler et al.，Eur.J.Immunol.6：292，1976)。本发明的抗体包括可以阻抑PRL-1功能的抗体，也可以是不影响人PRL-1功能的抗体。每一类抗体都可以通过对人PRL-1基因产物的片段或功能域致免疫而产生，而人PRL-1基因产物及其片段可以用重组方法产生或用多肽合成仪进行合成。与非修饰形式的PRL-1基因产物结合的抗体，可以利用在原核细胞例如E.coli中产生的基因产物来免疫动物而得到。与翻译后修饰形式如糖基化或磷酸化PRL-1蛋白或多肽结合的抗体，可以利用在真核细胞如酵母或昆虫细胞中产生的基因产物来免疫动物而得到。