[发明专利]DC靶向肽及其应用

说明书

  

技术领域

    本发明属于多肽领域，尤其是涉及DC靶向肽及其制备方法和应用。 

背景技术

癌症是全球导致死亡的主要原因之一，2007年全球死于癌症的人数达到790万，约占所有死亡人数的13%，发病率呈逐年上升趋势。其治疗主要以手术、化疗和放疗为主，但放化疗副作用大，疗效都不是很理想。目前，免疫细胞治疗正在成为一种新的癌症治疗手段。 

随着分子生物学和免疫学等基础学科的飞速发展，对肿瘤的研究日益深入，特别是近十几年来，多种与肿瘤的发生发展密切相关的肿瘤抗原被发现，这些抗原可以作为癌症免疫治疗的靶标。 肿瘤特异性的抗原可以通过DC（dendritic cells ，树突状细胞）细胞递呈给T细胞，启动T细胞的特异性杀伤肿瘤的能力。（Banchereau, J., and Steinman, R. M. (1998) Dendritic cells and the control of immunity. Nature 392, 245–2522. Palucka, K., Banchereau, J., and Mellman, I. (2010) Designing  vaccines based on biology of human dendritic cellsubsets.Immunity33, 464–478）。如何让抗原准确高效的到达DC细胞，是肿瘤免疫治疗的关键。噬菌体展示技术为我们提供了一种筛选DC靶向分子的方法。 

噬菌体展示技术，在1985 年首次被Smith阐述,原理是通过将外源蛋白或肽段的基因克隆到丝状噬菌体的基因组DNA中, 与噬菌体的外壳蛋白形成融合蛋白, 从而使该外源分子呈现于噬菌体表面。该技术的主要特点是将特定分子的基因型和表型统一在同一噬菌体颗粒内, 即在噬菌体表面表达特定蛋白,而在噬菌体核心DNA 中含有该蛋白的结构基因, 通过表型筛选就可以获得其编码基因, 因此噬菌体展示技术是一种强有力的基因表达筛选技术。噬菌体展示肽库技术具有高库容、高效方便及灵活的筛选技术等特点，近几年已经广泛用于抗肿瘤疫苗，药物，及肿瘤诊断标志物的筛选研发（Johnson DH.Targeted therapy in non-small cell lung cancer.myth and reality[J].lung Cancer,2003,41 (suppl1):S3-S8） 

MUC1又称附膜蛋白,是由muc1基因表达的一种高分子量,高糖基化蛋白,它一种是跨膜分子。它在上皮更新与分化，维持上皮完整性和癌的发生与转移等方面都起到重要的作用(Moniaux N，Escande F，Porchet N,et alStructural organization and classification of the human mucin genes〔J〕Front Biosci，2001；6(1):D1192206)。正常情况下,MUC1 可在多种组织、器官中的上皮细胞如消化道、呼吸道、乳腺、胰腺、生殖道中表达，主要分布于腺细胞顶膜或以分泌形式存在于腺腔内，不被免疫系统识别。而在恶性肿瘤细胞中, 乳腺癌、胃癌、结肠癌等多种癌组织中, MUC1表达量可达正常时的10倍以上,且结构发生改变，使MUC1 的核心蛋白暴露出新的蛋白表位或新的糖抗原,分布于整个癌细胞表面，作为肿瘤特异的抗原，成为免疫细胞攻击靶点(Miles DW，TaylorPapadimitriou JTherapeutic aspects of polymorphic epithelial mucin in adenocarcinoma〔J〕Pharmacol Ther，1999；82(1):97106),

本发明通过从噬菌体展示技术从肽库中筛选得到了一种可以高效靶向DC细胞的多肽, 并与MUC1肿瘤特异性多肽抗原融合，利用多肽固相合成方法合成了“DC靶向融合肽”。并对其DC靶向能力、DC细胞致敏能力和激活CTL细胞肿瘤杀伤能力进行了评价。

  

发明内容

本发明的一个目的是提供一种靶向DC细胞的多肽。 

本发明所提供的DC靶向多肽，其氨基酸序列如SQE ID No:1或者SQE ID No:2或者SQE ID No:3所示。本发明提供一种DC靶向肽介导的DC-CTL免疫细胞治疗技术。 

比起其他技术靶向肽技术具有以下优点：