[发明专利]一种植物氮、磷同时测定方法

说明书

技术领域

本发明属于植物营养技术领域，具体地说，涉及一种植物氮、磷同时测定方法。

背景技术

目前用连续流动分析法(简称CFA法)同时测定植物氮(N)、磷(P)含量的原理基本一致，即样品中的有机氮、有机磷经硫酸和过氧化氢消煮、氧化分解，分别转化成无机铵盐和无机磷酸盐，用CFA法同时测定消解液中氮、磷含量；其中氮的测定，以磷酸氢二钠溶液为缓冲液、酒石酸钾钠为络合剂、亚硝基铁氰化钠为催化剂，在碱性条件下，样品中的铵与水杨酸钠和次氯酸钠反应生成蓝色化合物靛蓝染料,在660nm波长下检测；磷的测定则以酒石酸锑钾为催化剂，在酸性条件下，样品中的磷与钼酸铵生成三元杂多酸，被抗坏血酸还原为蓝色化合物磷钼蓝，也在660nm波长下检测。但目前用CFA法同时测定植物氮、磷的方法，在测试试剂方面存在以下二点不足：(1)在氮测试缓冲液的保存方法及显色剂种类上存在不足，①：缓冲液必须现配现用，否则放置几天即出现混浊沉淀；②显色剂——次氯酸钠不稳定易分解，其浓度会随着运输、贮存过程及每次开盖使用而逐渐降低；未开启的次氯酸钠原液(有效氯含量>7.5％)，据我们测定，室内贮存5个半月有效氯下降至3.9％，下降48.0％，因此其实际浓度必须根据测试来确定，且须现配现用(贝美容,罗雪华,杨红竹.AA3型连续流动分析仪(CFA)同时测定橡胶叶全氮、全磷、全钾的方法研究[J].热带作物学报,2011(7):1258-1264)。(2)经过多次对上述贝美容等的方法的后续试验发现，磷的测试过程中存在测试基线不断抬升的缺点，即试剂空白的信号值不断抬升，相应地标准溶液及样品待测液磷的测定信号值也随之升高，这就存在计算待测液中磷含量时需通过仪器配套软件进行较大的基线校正的缺点。

发明内容

本发明的目的是提供一种植物氮、磷同时测定方法，以解决现有技术中氮测试试剂稳定性差、磷测试试剂吸收值较高和测试基线不断抬升的问题。

为了实现本发明的目的，本发明一种植物氮、磷同时测定方法，是基于连续流动分析仪的植物氮、磷同时测定的方法，包括植物样品经硫酸-过氧化氢消解、制备样品待测液，配制氮、磷混合标准溶液，配制氮、磷测试试剂，并设定氮、磷测试通道试剂流路、试剂流量(见图1)，样品待测液以自动进样器一次进样、连续流动分析仪同时测定其氮、磷含量。具体步骤和方法如下：

1)制备样品待测液：称取过1mm筛的均匀植物干样约0.06g～0.1g，置于25ml刻度消煮管内，加入1.5ml硫酸(H₂SO₄，ρ＝1.84g/cm³)，然后置消煮管于16孔消煮铝锭中，以六联电炉加热消煮，先低温煮约1小时至硫酸发白烟，再高温消煮，待溶液呈棕褐色时，取出消煮管冷却1～2分钟，乘热逐滴加入30％过氧化氢4～5滴，一边滴加一边摇匀，继续加热10～15min后，如溶液仍为黄色，则继续滴加过氧化氢1～2滴，如此反复至消解液呈无色或清亮后，再继续加热10～15min，以除尽多余的过氧化氢。消解液冷却后，以水定容，再稀释5倍后制得样品待测液。同时做试剂空白试验。

2)配制氮、磷混合标准溶液：以50mg/L N、12mg/L P为工作母液，分别吸取0、0.5、1.5、3、6、10、14、18、22、25mL于10个50mL容量瓶中，各加入5％的硫酸溶液10mL，以水定容，其中含N：0、0.5、1.5、3、6、10、14、18、22、25mg/L；含P：0、0.12、0.36、0.72、1.44、2.4、3.36、4.32、5.28、6mg/L。N为NH₄⁺-N。

3)配制氮、磷测试试剂：

R0——系统润洗液(氮)：称取聚氧乙烯月桂醚0.6g，溶于1L水中；

R1——进样器清洗液：吸取硫酸(H₂SO₄，ρ＝1.84g/cm³)10ml缓慢加入800ml水中，冷却、定容至1L；

R₂——氮测试缓冲液(pH13.1～13.3):称取磷酸氢二钠(Na₂HPO₄·12H₂O)35.8g、氢氧化钠10g～15g、酒石酸钾钠45g，溶于950mL水中，然后定容至1L，最后加入聚氧乙烯月桂醚0.6g，溶解，保存于塑料试剂瓶；

R₃——水杨酸钠溶液：称取水杨酸钠4g、亚硝基铁氰化钠0.1g，溶于100mL水中；