[发明专利]一种直接测定冬虫夏草产品中冬虫夏草多糖肽含量的方法有效
申请号: | 201410320033.4 | 申请日: | 2014-07-07 |
公开(公告)号: | CN104090038A | 公开(公告)日: | 2014-10-08 |
发明(设计)人: | 黄宏南;吴志仁;王娟娟 | 申请(专利权)人: | 黄宏南 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02 |
代理公司: | 福州市众韬专利代理事务所(普通合伙) 35220 | 代理人: | 陈智雄;黄秀婷 |
地址: | 350000 福建省福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 直接 测定 冬虫夏草 产品 多糖 含量 方法 | ||
1.一种直接测定冬虫夏草产品中冬虫夏草多糖肽含量的方法,其特征在于:所述方法包括以下步骤:
(一)样品处理
称取冬虫夏草产品适量,加水后进行水浴提取,待其冷却后,加水定容成浓度为5.00mg/ml的虫夏草产品水溶液,过滤该溶液,取部分滤液加无水乙醇后通过离心机离心,然后取沉淀物采用流动相溶解,过有机滤膜后得样品溶液备用;
(二)高效液相色谱仪的测定
将步骤(一)所得样品溶液取适量加入到高效液相色谱仪中进行测定,并对测定结果进行定性分析;
(三)标准曲线的制定
精密称取干燥至恒重的冬虫夏草多糖肽标准品0.0500g于10ml容量瓶中,用水溶解并定容,得浓度为5.00mg/ml的冬虫夏草多糖肽标准备用液,然后分别取100μl、200μl、300μl、400μl、500μl标准备用液于5ml容量瓶中,加水定容,得到浓度分别为100.0μg/ml、200.0μg/ml、300.0μg/ml、400.0μg/ml、500.0μg/ml的标准工作液,将标准工作液通过高效液相色谱仪进行测定,所得数据以浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,建立浓度-峰面积标准曲线,并得出标准方程。
(四)样品中冬虫夏草多糖肽含量的确定
根据浓度-峰面积标准曲线得出的线性方程,将步骤(二)中样品溶液里所测得的冬虫夏草多糖肽的峰面积换算为浓度,从而计算出该冬虫夏草产品中的冬虫夏草多糖肽含量。
2.如权利要求1所述一种直接测定冬虫夏草产品中冬虫夏草多糖肽含量的方法,其特征在于:高效液相色谱仪测定时,液相色谱条件为:色谱柱为Atlantis T3色谱柱,其规格为4.6×250mm、i.d..5μm,柱温为35℃,流动相为体积分数为5%的甲醇水溶液,流速为1ml/min,进样量为10μl,检测器为二极管阵列检测器,扫描波长为190nm—460nm。
3.如权利要求1所述一种直接测定冬虫夏草产品中冬虫夏草多糖肽含量的方法,其特征在于:所述水浴提取的温度为60℃,时间为30分钟。
4.如权利要求1所述一种直接测定冬虫夏草产品中冬虫夏草多糖肽含量的方法,其特征在于:所用离心机的转速为9000rpm,离心时间为15分钟。
5.如权利要求1所述一种直接测定冬虫夏草产品中冬虫夏草多糖肽含量的方法,其特征在于:所用有机滤膜为0.22μm有机滤膜。
6.如权利要求1所述一种直接测定冬虫夏草产品中冬虫夏草多糖肽含量的方法,其特征在于:所述冬虫夏草产品包括冬虫夏草药材原料和冬虫夏草保健食品。
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