[发明专利]一种提高蛋白质利用率的多肽生产方法

说明书

技术领域

本发明涉及肽的制备方法，具体涉及一种提高蛋白质利用率的多肽生产方法。

背景技术

多肽通常是指其肽链中具有2－50个氨基酸残基的物质。与大分子的蛋白质相比，不同的多肽具有不同的生理功能，例如：延缓机体的衰老，减少各种老年性疾病的发生；抑制皮肤老化；降血压，降血脂，提高免疫力。多肽除了具有各种生理功能外，还可提高食品的稳定性，延长食品的储藏期，并具有溶解性好、加工性能好、不过敏、容易吸收等特点。因此，多肽是食品、保健品和营养品的重要配料。

多肽的来源包括:（1）从天然生物体中提取；（2）在胃肠道消化蛋白质的过程中产生，或通过体外酶解蛋白质产生；（3）化学合成、酶法合成或重组DNA 技术合成。由于含量很少或提取困难，从天然生物体中提取的多肽不能满足人类大规模的需求。药理级多肽常用的化学合成法有副反应发生，这些副产物对人体有害。酶法生产多肽因其具有生产条件温和、安全性高、价格低廉等优点，是生产多肽的主流方法。

生产多肽的原料包括植物蛋白、动物蛋白和藻类蛋白。植物蛋白包括大豆蛋白、麦胚蛋白、玉米醇溶蛋白、菜籽蛋白、花生蛋白、油茶籽蛋白、葵花籽蛋白等；动物蛋白包括乳蛋白、鱼类蛋白、卵白蛋白、胶原蛋白等；藻类蛋白包括裂壶藻蛋白、螺旋藻蛋白、寇氏隐甲藻蛋白、吾肯氏藻蛋白等。

现有多肽生产方法一般采用一种蛋白酶或多种蛋白酶的组合，进行一次酶解，其缺陷是蛋白质利用率较低，一般在40%(重量)以下。为了提高得率或蛋白质利用率，通常采取增加酶的用量、延长反应时间等方式来满足，然而，实际上，酶的用量、反应时间等酶解参数是相互制约的，在一定的条件下，靠延长反应时间来提高得率或蛋白质利用率，其效果并不明显，而且会产生大量的游离氨基酸，影响产品的品质。

另外，多肽的生产过程中，面临的问题之一是脱盐，因为酶解过程中反复调节pH值，酶解液中盐的含量较高。虽然酶解可使原先埋藏在蛋白质分子内部的疏水性氨基酸暴露出来，从而使蛋白酶解物从水相通过疏水作用吸附到树脂的疏水表面，并可利用不同浓度洗脱剂的不同极性对蛋白酶解物进行分级纯化，而酶解物中的无机盐则因不被树脂吸附而在水洗脱时去除，但这些方法工艺复杂，成本很高。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种提高蛋白质利用率的多肽生产方法，这种多肽生产方法通过相对独立的三次连续酶解，既能提高对原料的蛋白质利用率，又能获得品质优良的多肽产品。采用的技术方案如下：

一种提高蛋白质利用率的多肽生产方法，其特征在于依次包括如下步骤：

（1）原料预处理：取含蛋白质的原料，加水浸泡后得到第一料液；

（2）均质处理：将步骤（1）得到的第一料液搅拌均匀后进行均质处理；

（3）碱性蛋白酶酶解：将均质处理后的第一料液灭菌后调整其温度至37－50℃，并调节其pH值至7.5－9.5，然后加入占原料重量1－5%的蛋白酶，在搅拌的情况下酶解1－3 小时；

本步骤所用的蛋白酶是碱性蛋白酶、胰蛋白酶和Protamex复合蛋白酶中的一种或其中两种的组合；

（4）第一次灭酶、离心分离：将步骤（3）得到的酶解液灭酶，然后以3000－4500转/分钟的转速离心10－15分钟，得到上清液A和沉淀A；

（5）中性蛋白酶酶解：将沉淀A加水并搅拌均匀，得到第二料液；然后将第二料液的温度调整到37－50℃，并调节其pH值至7.0－7.5，再加入占沉淀A重量2－8%的蛋白酶，在搅拌的情况下酶解1－3 小时；

本步骤所用的蛋白酶是中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和风味酶中的一种或其中两种的组合；

（6）第二次灭酶、离心分离：将步骤（5）得到的酶解液灭酶，然后以3000－4500转/分钟的转速离心10－15分钟，得到上清液B和沉淀B；

（7）酸性蛋白酶酶解：将沉淀B加水并搅拌均匀，得到第三料液；然后将第三料液的温度调整到37－50℃，并调节其pH值至3－5，再加入占沉淀B重量1－5%的蛋白酶，在搅拌的情况下酶解1－2 小时；

本步骤所用的蛋白酶是酸性蛋白酶和胃蛋白酶中的一种或两者的组合；

（8）第三次灭酶、离心分离：将步骤（7）得到的酶解液灭酶，然后以3000－4500转/分钟的转速离心10－15分钟，弃去沉淀，得到上清液C；

（9）将上清液A、上清液B和上清液C混合并将其混合液的pH值调节到6.5－7.0，得到多肽混合液；

（10）除去多肽混合液中的水，得到多肽。

优选步骤（1）中，所用原料的蛋白质含量>35%(重量)。