[发明专利]珍珠透骨草总黄酮的制备方法及应用

说明书

技术领域

本发明属于从中药中提取制备总黄酮的方法领域，特别是涉及到从珍珠透骨草中制备总黄酮的方法，以及总黄酮在体外抑制糖苷酶和对脂多糖诱导下RAW264.7细胞炎症模型的抗炎的作用，和用于治疗各种癌症以及适用于人体各系统、器官、组织各种炎性病变的抗炎镇痛以及创伤，手术，骨折，癌症等引起的疼痛。

背景技术

珍珠透骨草Speranskiatuberculata(Bunge)Baill.为大戟科Euphorbiaceae地构叶属植物SperanskiaBaill.的干燥全草，是我国特有属。除了东部和西部，全国各省市区都有野生。珍珠透骨草民间又称“气死大夫草”，具有祛风，除湿，舒筋，活血，止痛的功效，用于风湿痹痛，筋骨挛缩，寒湿脚气，疮癣肿毒等症。

据文献报道珍珠透骨草主要含有生物碱、黄酮、挥发油和甾醇类成分，现代药理研究发现其内的阿魏酸具抗炎作用。

随着社会的越来越好的发展，炎症性疾病也越发的增多，因此新开发的抗炎药物也由此而生，但使现在的抗炎药物仍然存在不良反应较大、安全性比较低等一些问题。所以，开始寻找一种安全、有效的抗炎药物仍然是一个主要的问题要解决，以及如何选择合适的模型，初步筛选抗炎作用的消炎药及其作用机制是要成为其中的一个重要课题。

糖尿病是危害人类健康的重大疾病之一，在各种类型的糖尿病当中以2型糖尿病的发病率较高。而阐明内源性低分子抑血糖物的化学本质是这一领域研究的核心问题。首先，从植物中筛选出的活性化成分可作为化学治疗的补充，其次，小分子抑血糖物作用机理的研究有助于对降血糖药物本质认识的深入及加强降血糖活性物质筛选的针对性。

综上所述，本领域亟需要一种新的技术方案来解决这些问题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：提供了一种从珍珠透骨草中提取、制备总黄酮的方法，以及根据该技术所得总黄酮提取物的体外抑制糖苷酶和对脂多糖诱导下RAW264.7细胞炎症模型的抗炎活性功能，和用于治疗各种糖尿病以及适用于人体各系统、器官、组织各种炎性病变的抗炎镇痛以及创伤，手术，骨折，癌症等引起的疼痛。

珍珠透骨草总黄酮的制备方法，其特征在于：

包括以下步骤

步骤一、将珍珠透骨草于干燥箱中进行干燥脱去水分，将干燥后的珍珠透骨草粉碎，粉碎的细度为10目～30目；

步骤二、继续步骤一的操作采用体积比为10％～90％的提取溶剂乙醇在室温25℃的温控下浸渍两次，每次2天～15天，合并浸渍液，将浸渍液加热至70°进行回流提取两次，合并提取液，将提取液在压力为1kpa～2.67kpa条件下浓缩至相对密度为1.2的呈稠膏状的提取物；

步骤三、将步骤二中制得的生药加水并搅拌，生药与水的重量比为(1:6)～(1:8)，在室温25℃的温控下冷却沉淀4小时，沉淀后于1200rad/min～1600rad/min的离心机内沉降离心15分钟～30分钟，离心完毕后取上清液备用；

步骤四、纯化的柱材料为大孔吸附树脂，取大孔吸附树脂按照与生药的重量比为1：(1～2)的比例装柱，将步骤三备用的上清液上样；

步骤五、继续上一步的操作，首先用2倍～4倍柱体积去离子水洗脱，再用4倍～6倍柱体积乙醇进行梯度洗脱，其中乙醇的体积比20％～80％，收集乙醇洗脱液，在50°～70℃压力为1kpa～2.67kpa条件下浓缩至相对密度为1.2呈稠膏状的提取物，在50°～70℃干燥，粉碎后得珍珠透骨草总黄酮提取物，得率重量比为2.5％～3.2％。

所述的步骤二中提取溶剂为甲醇。

所述的步骤二中提取方式为浸渍提取、超声提取或渗漉提取。

所述的步骤四中纯化的柱材料为聚酰胺。

所述的步骤五中采用稀乙醇洗脱去杂。

所述的步骤五中粉碎后得珍珠透骨草总黄酮提取物，对该提取物采用紫外分光光度法，以NaNO₂-Al(NO)₃-NaOH显色测定总黄酮含量，以芦丁计，黄酮类化合物的总含量不低于50％。

珍珠透骨草总黄酮的应用，其特征在于：珍珠透骨草总黄酮在体外抑制糖苷酶，同时对LPS刺激的脂多糖具有抗炎作用。

珍珠透骨草总黄酮的应用，其特征在于：珍珠透骨草总黄酮于抗炎镇痛药物之中应用。