[发明专利]Southern印记杂交用恒压转膜夹

说明书

技术领域

本发明涉及转膜装置技术领域，更具体的说，本发明涉及一种Southern 印记杂交用恒压转膜夹。

背景技术

Southern印迹杂交（Southern blot）是1975年由英国人southern创建，是研究DNA图谱的基本技术，在遗传病诊断、DNA图谱分析及PCR产物分析等方面有重要价值。Southern 印记杂交是分子生物学的经典实验方法，其基本原理是将待检测的DNA样品固定在固相载体上，与标记的核酸探针进行杂交，在与探针有同源序列的固相DNA的位置上显示出杂交信号，通过Southern杂交可以判断被检测的DNA样品中是否有与探针同源的片段以及该片段的长度，该项技术广泛被应用在遗传病检测、DNA指纹分析和PCR产物判断等研究中。由于该技术的操作比较烦琐、费时，所以现在有一些其他的方法可以代替Southern 杂交，但该技术也有它的独特之处，是目前其他方法所不能替代的，如限制性酶切片段的多态性(RFLP)的检测等。

在Southern印迹杂交实验中，有一个环节需要将凝胶中的DNA片段转移到硝酸纤维素膜上去，一般采用传统的毛细法转膜，该法是在适当的吸水纸上面加上重物，利用重物的压力挤压凝胶使凝胶上变性的DNA转移到硝酸纤维素膜上。其原理是：容器中的转移缓冲液含有高浓度的NaCl和柠檬酸钠，上层吸水纸的虹吸作用使缓冲液通过滤纸桥、滤纸、凝胶、硝酸纤维素滤膜向上运动，同时带动凝胶中的DNA片段垂直向上运动，凝胶中的DNA片段移出凝胶而滞留在膜上。在实验时，通常将滤纸、凝胶、硝酸纤维素滤膜、滤纸、多层吸水纸依次叠放在电泳槽内的载物平台上，然后在吸水纸上压上玻璃板，在玻璃板上放上砝码来完成这一过程。虽然该方法实验器具简单，但装置由于缺少支撑物，稳定性差，砝码容易倾倒，造成转膜失败。另外，Southern印迹转膜的时间通常在24小时左右，如若缺少人员在旁边守护，吸水纸更换不及时，导致受力不均，或者更换吸水纸时候操作不当也会造成转膜失败，而且，利用毛细法转膜转移效率不高，尤其对分子量较大的DNA片段更是如此 。公开号为CN101519633A的专利公开了一种核酸印迹转膜装置，包括一个用于盛放溶液的转膜槽，转膜槽上部设置有一个载物平台，载物平台上方设置有一个可上下运动的带有配重的压板，压板与转膜槽之间通过滑杆连接。虽然该装置提高了转膜过程的稳定性，但该装置只能根据凝胶的厚薄笼统估算所需重物的压力，不能数字化准确调节作用在凝胶上的压力，且该装置也不能实现在恒压条件下快速更换吸水纸， 达不到最佳转膜效果。

发明内容

为了克服现有技术的缺陷，本发明的目的在于提供一种简单实用、操作方便、转膜效率高的Southern 印记杂交用恒压转膜夹。

本发明所述的Southern 印记杂交用恒压转膜夹，包括底部固定设置有压力计2的变压存液槽1，压力计2表面固定设置载物台3，载物台3上方设置有一个可上下运动的两端带孔的夹板4，带孔夹板4与变压存液槽1之间通过带有可拆卸旋转螺母5的加长螺杆6连接，所述螺母5用于固定夹板4，所述带螺母加长螺杆6固定设置在存液槽1的两侧，所述带孔夹板4下部中间位置固定连接带有螺栓7的液压伸缩杆8，螺栓7用于调节液压伸缩杆8的伸缩长度，所述液压伸缩杆8下端固定连接压板9，刻度尺10平行于螺杆6固定连接在存液槽1的后面。

优选地，所述变压存液槽1为长方体容器，所述压力计2镶嵌在变压存液槽1的底部。

优选地，所述载物台3为长方体塑料载物台，所述压力计2与所述载物台3之间采用专用胶固定粘结。

优选地，带螺母加长螺杆6以焊接的方式与所述存液槽1固定连接。

进一步优选地，所述带螺母加长螺杆6固定设置在存液槽1的两侧中心线位置。

优选地，所述带螺母加长螺杆6的直径为10mm，带孔夹板4两端圆孔直径为12mm。

优选地，液压伸缩杆8下端通过焊接的方式固定连接压板9，压板9是整个装置的施压部分，使用时将压板9向上提起，然后旋紧螺栓7，待压力稳定以及转膜材料准备好以后打开螺栓即可。

优选地，刻度尺10用螺丝平行于螺杆固定连接存液槽1的后面，刻度尺10的作用主要是为了调节带孔夹板4的水平，使夹板保持平衡稳定，凝胶受力均一、压力计的度数更准确。