[发明专利]基于螺旋藻诱导气孔免疫闭合的蒸腾抑制剂的制备方法

权利要求书

1. 基于螺旋藻诱导气孔免疫闭合的蒸腾抑制剂的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤：

步骤(1).制备螺旋藻剂A： 

首先将淡水螺旋藻Spirulina platensis接种到灭菌后的液体螺旋藻培养基中，置于光照培养箱中培养，培养温度控制在25～30℃，培养8～10个光照周期，一个光照周期为24小时，首先采用光强为2500～3500 lx的光光照12 h，再置于黑暗中10 h，得到培养后的螺旋藻液；然后将培养后的螺旋藻液置于离心机中离心，转速为2000～2500转/分，离心后取沉淀洗涤并干燥，然后用蒸馏水进行稀释，得到浓度为10～15 g/L的纯螺旋藻溶液；将配制好的纯螺旋藻液置于121℃、 0.12～0.15 Mpa压力的高压灭菌锅中灭活70～90分钟，待冷却后，于-20℃冻存，制成螺旋藻剂A；

所述的淡水螺旋藻Spirulina platensis购买于中国科学院典型培养物保藏委员会淡水藻种库，保藏编号为FACHB-439；

步骤(2).制备辅剂B：

将CaCl₂·2H₂O和蔗糖溶解于蒸馏水中，搅拌均匀，得到辅剂B；辅剂B中CaCl₂·2H₂O的浓度为2 g/L，蔗糖的浓度为0.4 g/L；

步骤(3).制备蒸腾抑制剂：

将步骤(1)螺旋藻剂A加入到步骤(2)辅剂B中，搅拌混匀即可；其中步骤(1)螺旋藻剂A与步骤(2)辅剂B的体积比为0.03～0.06 ：1。

2.如权利要求1所述的基于螺旋藻诱导气孔免疫闭合的蒸腾抑制剂的制备方法，其特征在于所述的液体螺旋藻培养基为溶液Ⅰ、溶液Ⅱ、维生素B₁₂的混合液；其中溶液Ⅰ与溶液Ⅱ的体积比为1:1，维生素B₁₂的浓度为5×10^-6 g/ L；溶液Ⅰ由碳酸氢钠13.61 g/500 ml、碳酸钠4.03 g/500 ml、磷酸氢二钾0.5 g/500 ml配制得到；溶液Ⅱ由硝酸钠2.50 g/500 ml、氯化钠1.00 g/500 ml、硫酸钾1.00 g/500 ml、硫酸镁0.20 g/500 ml、氯化钙0.04 g/500 ml、硫酸亚铁0.01 g/500 ml、乙二胺四乙酸0.08 g/500 ml配制得到。