[发明专利]复合解盐菌及其在农业上的应用有效
申请号: | 201410327649.4 | 申请日: | 2014-07-10 |
公开(公告)号: | CN104087538B | 公开(公告)日: | 2017-03-08 |
发明(设计)人: | 杜清华;任黎青 | 申请(专利权)人: | 莘县鲁西农业生物科技研究所 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/16;C12N1/14;C09K17/00;C09K101/00;C09K109/00 |
代理公司: | 济南智圆行方专利代理事务所(普通合伙企业)37231 | 代理人: | 杜文娟 |
地址: | 252400 山东省*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 复合 解盐菌 及其 农业 应用 | ||
1.一种复合解盐菌,其特征在于,所述复合解盐菌由腐生菌与硝化细菌和硫细菌中的一种或两种组成;
当所述复合解盐菌由腐生菌与硝化细菌和硫细菌中的一种组成时,其中所述复合解盐菌中菌的个数比为腐生菌:硝化细菌或硫细菌为5-50:1;
当所述复合解盐菌由腐生菌、硝化细菌和硫细菌组成时,其中所述复合解盐菌中菌的个数比为腐生菌:硝化细菌:硫细菌为5-50:0.3-1:0.3-1。
2.根据权利要求1所述的复合解盐菌,其特征在于,当所述复合解盐菌由腐生菌与硝化细菌和硫细菌中的一种组成时,其中所述复合解盐菌中菌的个数比为腐生菌:硝化细菌或硫细菌为10-30:1;
当所述复合解盐菌由腐生菌、硝化细菌和硫细菌组成时,其中所述复合解盐菌中菌的个数比为腐生菌:硝化细菌:硫细菌为10-30:0.5-1:0.5-1。
3.根据权利要求1或2所述的复合解盐菌,其特征在于,所述腐生菌为芽孢杆菌、根菌、酵母菌、光合细菌、霉菌中的任意一种或几种的混合。
4.根据权利要求1-3任一项所述的复合解盐菌,其特征在于,所述硝化细菌为亚硝化单胞菌、亚硝化螺菌、硝化刺菌和硝化球菌中的任意一种或几种的混合。
5.根据权利要求1-4任一项所述的复合解盐菌,其特征在于,所述硫细菌为贝氏硫细菌、发硫菌、硫小杆菌、硫化叶菌、紫硫细菌和绿硫细菌中的任意一种或几种的混合。
6.根据权利要求1-5任一项所述的复合解盐菌,其特征在于,所述腐生菌与所述硝化细菌和/或所述硫细菌的总数为每毫升0.2-30亿个。
7.根据权利要求1-6任一项所述的复合解盐菌,其特征在于,所述腐生菌与所述硝化细菌和/或所述硫细菌分别在培养基中培养;所述培养基中各组分的质量份数比为:海带,海鱼、虾皮、甲壳混合物共计30-200份,蛋白胨5-15份、葡萄糖或麦芽糖20-40份、琼脂10-30份、氯化钠3-7份、水1000份。
8.根据权利要求1—7任一所述的复合解盐菌的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)菌株传代
a、培养基中各组分的质量份数比为:海带,海鱼、虾皮、甲壳混合物共计30-200份,蛋白胨5-15份、葡萄糖或麦芽糖20-40份、琼脂10-30份、氯化钠3-7份、水1000份,按比例取蛋白胨、琼脂和水加热,不断搅拌,待琼脂溶解后,按比例加入葡萄糖或麦芽糖,搅拌,使它溶解,然后分装,高压蒸汽灭菌器灭菌;接着按比例加入上述海带,海鱼、虾皮、甲壳的混合物,氯化钠,得培养液;将培养液PH值调整为6.5-8.0,得培养基,备用; b、培养菌株:在上述配置好的培养基中分别培养菌株:
将腐生菌菌株1-2株,每株10-15个置于培养基中,调节摇床或振荡培养箱至30-60rpm,振幅18-22mm,28-32℃下振荡培养24小时;
将硝化细菌菌株1-2株,每株15-20个置于培养基中,调节摇床或振荡培养箱30-60rpm,振幅18-22mm,23-27℃下振荡培养24小时;和/或将硫细菌菌株1-2株,每株10-15个置于培养基中,调节摇床或振荡培养箱30-60rpm,振幅18-22mm,30-36℃下振荡培养24小时;
(2)传代次数:腐生菌菌株与硝化细菌菌株和/或硫细菌菌株的主种子批菌种启开后传代次数均为1-2代,工作种子批菌种启开后至接种生产用培养基传代次数均为1-2代;
(3)复合解盐菌混合液的制备
上述菌株采用直接计数法计数后,按照腐生菌菌株:硝化细菌菌株或硫细菌菌株5-50:1或者腐生菌菌株:硝化细菌菌株:硫细菌菌株为5-50:0.3-1:0.3-1的比例混合,于60-90℃下热灭活80-100分钟后,用含苯酚2.0g/L的苯酚生理盐水稀释,将混合菌株分别加入装有100ml-120ml苯酚生理盐水的烧杯中,配制成腐生菌菌株与硝化细菌菌株和/或硫细菌菌株的混合液;所得混合液均无沉淀的菌块或异物,混合液配制后立即置于冰乙醇浴中直至温度降到10℃,然后2-6℃下冻存,得复合解盐菌混合液。
9.根据权利要求1-7任一所述的复合解盐菌在农业中的应用,其特征在于,所述复合解盐菌应用于农业中时,每株作物灌注该复合解盐菌10-70克。
10.根据权利要求9所述的复合解盐菌在农业中的应用,其特征在于,所述复合解盐菌应用于农业中时,每株作物灌注该复合解盐菌30-50克。
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