[发明专利]一种诱导楸树体细胞胚发生的方法有效
申请号: | 201410327692.0 | 申请日: | 2014-07-08 |
公开(公告)号: | CN104041418A | 公开(公告)日: | 2014-09-17 |
发明(设计)人: | 王鹏;杨如同;李亚;马玲玲;汪庆;李林芳 | 申请(专利权)人: | 江苏省中国科学院植物研究所 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 211225 江苏省南京市溧水区*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 诱导 体细胞 发生 方法 | ||
1.一种诱导楸树体细胞胚发生的方法,包括下列步骤:
(1)楸树成熟种子处理
将楸树成熟的种子用纱布包好后用自来水冲洗30min,接着75%酒精表面灭菌60s,无菌水冲洗2次后用0.1%氯化汞溶液灭菌12min,无菌水冲洗6次。接种时剪开纱布,将种子两端边缘种皮略微剪破接种。(2)愈伤组织诱导
将处理过的楸树种子平铺于诱导愈伤的培养基上,培养基放置于温度25~28℃,无光照的培养室中暗培养20d后获得愈伤组织。
(3)愈伤组织的继代增殖培养
将愈伤组织放置在相同的诱导愈伤的培养基上,在光强为1500lux,光照时间是12h/d,温度25~28℃培养室中培养10d。
(4)体细胞胚的诱导
选择活力高的愈伤组织将其切成合适的小块后放置于诱导体细胞胚的培养基上,在光强为1500lux,光照时间是12h/d,温度25~28℃培养室中诱导楸树体细胞胚发生。
2.如权利要求1(2)中所述的诱导愈伤的培养基,其特征是1/2MS+0.3-0.5mg·L玉米素+0.3~0.9mg·L吲哚乙酸。KT为激动素。
3.如权利要求1(4)中所述的活力高的愈伤组织,其特征是浅黄色、紧致、表面上呈颗粒状的愈伤组织。
4.如权利要求1(4)中所述的诱导体细胞胚的培养基,其特征是MS+0.5-3.0mg·L激动素+0.05mg·L吲哚乙酸。
5.如权利要求1(4)中所述合适的小块,其特征是愈伤大小为0.5×0.5×0.5cm。
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