[发明专利]一种减压内部沸腾法提取黑松松针水溶性多糖的制备方法

权利要求书

1.一种减压内部沸腾法提取黑松松针水溶性多糖的制备方法，其特征在于：包括如下步骤，

(1)将黑松松针放在恒温干燥箱，干燥箱温度控制在40℃，干燥时间为24h，经过粉碎机粉碎，再进行80目筛选；

(2)称取1g预处理的松针粉末，将其放置在自制简易玻璃装置，2ml乙醇均匀润湿30min，使乙醇充分渗透物料；

(3)将负压吸引表压减至-0.080MPa，减压吸引至表面产生轻微沸腾气泡，过滤；

(4)用20倍体积85℃热水提取黑松松针多糖溶液，时间控制在6min，然后取少量提取液进行适当稀释后，用苯酚-硫酸法测多糖含量；

(5)用4℃乙醇沉淀提取的黑松松针多糖溶液，并放置过夜，离心后取沉淀于干燥箱中进行干燥；

(6)将干燥的黑松松针多糖溶液制成多糖制品。

2.如权利要求1所述的减压内部沸腾提取松针水溶性多糖的制备方法，其特征在于：所述减压内部沸腾法提取松针水溶性多糖包括内部沸腾法产生的结果及得出的最佳工艺条件。

3.如权利要求2所述的减压内部沸腾提取松针水溶性多糖的制备方法，其特征在于：所述减压内部沸腾法产生的结果包括如下：

(1)在2ml的90％乙醇，温度在90℃，提取时间5min，20，30，40，50倍的水提取松针多糖，计算多糖得率；当用水量为30倍时，多糖得率最大为3.86％达到最大值，因此选用30倍体积水量。

(2)在2ml的90％乙醇，30倍用水量的条件，提取温度为80，85，90，95，100℃条件下，通过多糖得率的变化得出在90℃时多糖的得率最大为4.37％，随着温度的增加得率又开始降低，当超过90℃时，可能温度过高破坏多糖结构从而多糖降低得率，因此选用温度为90℃。

(3)在确定30倍用水量，90％乙醇，温度在90℃条件下，提取时间为2、3、4、5、6min，计算多糖得率的变化，当提取时间为5min时多糖得率达到最为4.37％，6min时多糖得率达到最为4.39％。随着提取时间的增加，能增加多糖的溶出量，在5min已使提取达到相对稳定，因此选定提取时间5min。

(4)在确定30倍用水量，90℃乙醇，提取时间为5min，研究乙醇浓度为20％、40％、60％、80％，90％，100％时得率的变化，当乙醇浓度为40％，多糖得率达到最大为12.72％，因此选定40％乙醇浓度为最佳乙醇比例数值结果。

(5)根据以上单因数实验的结果，以多糖得率为响应值进行响应面分析，对于松针多糖得率模型，回归方程方差分析结果表明方程中的4个因素均为极显著，且其线性和平方项的影响也为极显著。同时，在所选择的试验范围内，4个因素对松针多糖得率影响的排序为乙醇浓度＞提取温度＞料液比＞提取时间，黑松松针多糖的得率实测值13.74％。

4.如权利要求2至3任一选项所述的减压内部沸腾提取松针水溶性多糖的制备方法，其特征在于：所述减压内部沸腾法提取黑松松针水溶性多糖的选择提取工艺条件为提取温度85℃，提取时间6min，料液比为20倍，乙醇体积分数50％。