[发明专利]一种抗Och1单克隆抗体的制备与应用有效
申请号: | 201410332277.4 | 申请日: | 2014-07-14 |
公开(公告)号: | CN105255845B | 公开(公告)日: | 2020-03-31 |
发明(设计)人: | 阎澜;张艳霞;王晓娟;王丽;姜远英 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军第二军医大学 |
主分类号: | C12N9/10 | 分类号: | C12N9/10;C12N5/20;C07K16/40;G01N33/577;G01N33/569;A61K39/395;A61P31/10;C12R1/91 |
代理公司: | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 | 代理人: | 赵青 |
地址: | 200433 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 och1 单克隆抗体 制备 应用 | ||
本发明涉及医学生物工程技术领域,本发明提供一种抗白念珠菌细胞壁蛋白Och1单克隆抗体、用于制备该单克隆抗体的多肽、分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞株,以及该单抗、用于制备抗Och1单克隆抗体的多肽、杂交瘤细胞株在制备Western Blot或免疫组化检测白念珠菌感染的试剂或试剂盒中的应用以及在制备预防或治疗白念珠菌感染药物中的应用。
技术领域
本发明涉及医学生物工程技术领域,具体涉及一种抗Och1单克隆抗体,以及该单克隆抗体在用于抗白念珠菌感染中的应用。
背景技术
OCH1是编码细胞壁α-1,6-甘露糖转移酶的基因,缺失可阻断对糖蛋白的过度糖基化,是白念珠菌毒力所必须的,真菌的特异性基因。因此,Och1蛋白是一个很有前景的基于抗体治疗的抗真菌靶标。
目前尚无有关抗Och1单克隆抗体的文献报道,也无抗Och1单克隆抗体用于抗侵袭性念珠菌的感染的文献报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种抗白念珠菌细胞壁蛋白Och1单克隆抗体、用于制备该单克隆抗体的多肽、分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞株,以及该单克隆抗体的应用。
本发明的第一方面,是提供一种用于制备抗白念珠菌细胞壁蛋白(Och1)单克隆抗体的多肽,其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的。
DWKLFTGMEQ(SEQ ID NO:1)
本发明的第二方面,是提供一种抗Och1单克隆抗体,是由保藏编号为CCTCC No:C201484的杂交瘤细胞株分泌产生。
本发明的第三方面,是提供一株杂交瘤细胞株,其保藏编号为CCTCC No:C201484。
本发明的第四方面,是提供一种抗Och1单克隆抗体的制备方法,该方法的步骤如下:
a)合成氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的多肽;
b)将上述多肽导入表达载体,表达并纯化,作为免疫原免疫小鼠;
c)取免疫鼠的脾细胞融合;
d)经多轮筛选出合成多肽反应阳性的细胞克隆,作为抗Och1单克隆抗体的杂交瘤细胞株CCTCC No:C201484;
e)通过在小鼠体内接种杂交瘤细胞生产腹水抗体,将腹水进行纯化,得到抗Och1单克隆抗体。
本发明的第五方面,是提供上述的用于制备抗Och1单克隆抗体的多肽在制备Western Blot或免疫组化检测白念珠菌感染的试剂或试剂盒中的应用。
以及,上述的抗Och1单克隆抗体在制备Western Blot或免疫组化检测白念珠菌感染的试剂或试剂盒中的应用。
以及,上述的杂交瘤细胞株在制备Western Blot或免疫组化检测白念珠菌感染的试剂或试剂盒中的应用。
进一步地,本发明还提供了上述的用于制备抗Och1单克隆抗体的多肽在制备预防或治疗白念珠菌感染药物中的应用。
以及,上述的抗Och1单克隆抗体在制备预防或治疗白念珠菌感染药物中的应用。
以及,上述的杂交瘤细胞株在制备预防治疗白念珠菌感染药物中的应用。
本发明的具体技术方案如下:
1.针对抗Och1的编码框氨基酸全序列(GENBANK ID:3641751)设计并合成16个多肽,序列分别为:
多肽1 KDDGMPEMEQ(SEQ ID NO:2)
多肽2 PTSTHKTEYN(SEQ ID NO:3)
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