[发明专利]一种西那普肽的多肽合成方法

权利要求书

1.一种西那普肽的多肽合成方法，其特征在于，包括如下步骤：以2-氯-三苯基氯树脂起始原料，按照固相合成的方法依次连接具有保护基团的氨基酸Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH进行缩合反应，获得保护二十一肽树脂，其间依次脱去Fmoc-保护基团，同步进行脱侧链保护基团；切肽，获得西那普肽粗品；纯化后制得西那普肽。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述按照固相合成的方法，获得保护二十一肽树脂，包括如下步骤：

一、制备Fmoc-Lys(Boc)-树脂

1）取2-氯-三苯基氯树脂用DMF浸泡，使树脂充分溶胀，加DIPEA，Fmoc-Lys(Boc)-OH，反应，再加甲醇，反应；

2）抽干，分别用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

二、制备Fmoc-Leu-Lys(Boc)-树脂

1）加脱帽试剂，反应，抽干，分别用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

2）取Fmoc-Leu-OH、HATU、HOAt，用接肽试剂溶解，加入反应容器，反应；

3）抽干，分别用DMF、甲醇和DMF洗涤三次，抽干；

三、制备Fmoc-Leu-Leu-Lys(Boc)-树脂

1）加脱帽试剂，反应，抽干，分别用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

2）取Fmoc-Leu-OH、HATU、HOAt，用接肽试剂溶解，加入反应容器，反应；

3）抽干，分别用DMF、甲醇和DMF洗涤三次，抽干；

四、制备Fmoc-Leu-Leu-Leu-Lys(Boc)-树脂

1）加脱帽试剂，反应，抽干，分别用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

2）取Fmoc-Leu-OH、HATU、HOAt，用接肽试剂溶解，加入反应容器，反应；

3）抽干，分别用DMF、甲醇和DMF洗涤三次，抽干；

五、制备Fmoc-Leu-Leu-Leu-Leu-Lys(Boc)-树脂

1）加脱帽试剂，反应，抽干，分别用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

2）取Fmoc-Leu-OH、HATU、HOAt，用接肽试剂溶解，加入反应容器，反应；

3）抽干，分别用DMF、甲醇和DMF洗涤三次，抽干；

六、制备Fmoc-Lys(Boc)-Leu-Leu-Leu-Leu-Lys(Boc)-树脂

1）加脱帽试剂，反应，抽干，分别用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

2）取Fmoc-Lys(Boc)-OH、HATU、HOAt，用接肽试剂溶解，反应；

3）抽干，分别用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

七、制备Fmoc-Leu-Lys(Boc)-Leu-Leu-Leu-Leu-Lys(Boc)-树脂

1）加脱帽试剂，反应，抽干，分别用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

2）取Fmoc-Leu-OH、HATU、HOAt，用接肽试剂溶解，加入反应容器，反应；

3）抽干，分别用DMF、甲醇和DMF洗涤三次，抽干；

八、制备Fmoc-Leu-Leu-Lys(Boc)-Leu-Leu-Leu-Leu-Lys(Boc)-树脂

1）加脱帽试剂，反应，抽干，分别用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

2）取Fmoc-Leu-OH、HATU、HOAt，用接肽试剂溶解，加入反应容器，反应；

3）抽干，分别用DMF、甲醇和DMF洗涤三次，抽干；

九、制备Fmoc-Leu-Leu-Leu-Lys(Boc)-Leu-Leu-Leu-Leu-Lys(Boc)-树脂

1）加脱帽试剂，反应，抽干，分别用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

2）取Fmoc-Leu-OH、HATU、HOAt，用接肽试剂溶解，加入反应容器，反应；

3）抽干，分别用DMF、甲醇和DMF洗涤三次，抽干；

十、制备Fmoc-Leu-Leu-Leu-Leu-Lys(Boc)-Leu-Leu-Leu-Leu-Lys(tBu)-树脂

1）加脱帽试剂，反应，抽干，分别用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

2）取Fmoc-Leu-OH、HATU、HOAt，用接肽试剂溶解，加入反应容器，反应；

3）抽干，用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

十一、制备Fmoc-Lys(Boc)-Leu-Leu-Leu-Leu-Lys(Boc)-Leu-Leu-Leu-Leu-Lys(Boc)-树脂

1）加脱帽试剂，反应，抽干，用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

2）取Fmoc-Lys(Boc)-OH、HATU、HOAt，用接肽试剂溶解，加入反应容器，反应；

3）抽干，用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

十二、制备Fmoc-Lue-Lys(Boc)-Leu-Leu-Leu-Leu-Lys(Boc)-Leu-Leu-Leu-Leu-Lys(Boc)-树脂

1）加脱帽试剂，反应，抽干，分别用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

2）取Fmoc-Leu-OH、HATU、HOAt，用接肽试剂溶解，加入反应容器，反应；

3）抽干，用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

十三、制备Fmoc-Leu-Lue-Lys(Boc)-Leu-Leu-Leu-Leu-Lys(Boc)-Leu-Leu-Leu-Leu-Lys (Boc) -树脂

1）加脱帽试剂，反应，抽干，分别用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

2）取Fmoc-Leu-OH、HATU、HOAt，用接肽试剂溶解，加入反应容器，反应；

3）抽干，用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

十四、制备Fmoc-Leu-Lue-Lue-Lys(Boc)-Leu-Leu-Leu-Leu-Lys(Boc)-Leu-Leu-Leu-Leu -Lys(Boc)-树脂

1）加脱帽试剂，反应，抽干，分别用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

2）取Fmoc-Leu-OH、HATU、HOAt，用接肽试剂溶解，加入反应容器，反应；

3）抽干，用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

十五、制备Fmoc-Leu-Lue-Leu-Lue-Lys(Boc)-Leu-Leu-Leu-Leu-Lys(Boc)-Leu-Leu-Leu- Leu-Lys(Boc)-树脂

1）加脱帽试剂，反应，抽干，分别用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

2）取Fmoc-Leu-OH、HATU、HOAt，用接肽试剂溶解，加入反应容器，反应；

3）抽干，用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

十六、制备Fmoc-Lys(Boc)-Leu-Lue-Leu-Lue-Lys(Boc)-Leu-Leu-Leu-Leu-Lys(Boc)-Leu- Leu-Leu-Leu-Lys(Boc)-树脂

1）加脱帽试剂，反应，抽干，用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

2）取Fmoc-Lys(Boc)-OH、HATU、HOAt，用接肽试剂溶解，反应；

3）抽干，用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

十七、制备Fmoc-Lue-Lys(Boc)Leu-Lue-Leu-Lue-Lys(Boc)-Leu-Leu-Leu-Leu-Lys(Boc)-Leu -Leu-Leu-Leu-Lys(Boc)-树脂

1）加脱帽试剂，反应，抽干，分别用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

2）取Fmoc-Leu-OH、HATU、HOAt，用接肽试剂溶解，加入反应容器，反应；

3）抽干，用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

十八、制备Fmoc-Lue-Lue-Lys(Boc)Leu-Lue-Leu-Lue-Lys(Boc)-Leu-Leu-Leu-Leu-Lys(Boc) -Leu -Leu-Leu- Leu-Lys(Boc)-树脂

1）加脱帽试剂，反应，抽干，分别用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

2）取Fmoc-Leu-OH、HATU、HOAt，用接肽试剂溶解，加入反应容器，反应；

3）抽干，用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

十九、制备Fmoc-Lue-Lue-Lue-Lys(Boc)Leu-Lue-Leu-Lue-Lys(Boc)-Leu-Leu-Leu-Leu- Lys(Boc)-Leu-Leu-Leu- Leu-Lys(Boc)-树脂

1）加脱帽试剂，反应，抽干，分别用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

2）取Fmoc-Leu-OH、HATU、HOAt，用接肽试剂溶解，加入反应容器，反应；

3）抽干，用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

二十、制备Fmoc-Lue-Lue-Lue-Lue-Lys(Boc)Leu-Lue-Leu-Lue-Lys(Boc)-Leu-Leu-Leu- Leu-Lys(Boc)-Leu -Leu-Leu-Leu-Lys(Boc)-树脂

1）加脱帽试剂，反应，抽干，分别用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

2）取Fmoc-Leu-OH、HATU、HOAt，用接肽试剂溶解，加入反应容器，反应；

3）抽干，用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

二十一、制备Fmoc-Lys(Boc)-Lue-Lue-Lue-Lue-Lys(Boc)-Leu-Lue-Leu-Lue-Lys(Boc)-Leu- Leu-Leu-Leu-Lys(Boc)-Leu-Leu-Leu-Leu-Lys(Boc)-树脂

1）加脱帽试剂，反应，抽干，用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

2）取Fmoc-Lys(Boc)-OH、HATU、HOAt，用接肽试剂溶解，反应；

3）抽干，用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

4）加脱帽试剂，反应，抽干，用DMF、甲醇和DMF洗涤，抽干；

所述接肽试剂为：DIPEA∶DMF=1∶10，体积比； 

所述脱帽试剂为：PIP∶DMF=24.5∶75.5，体积比； 

所述接肽反应温度为：0-5℃；接肽时间为：55分钟； 

所述脱帽反应温度为：21-23℃；脱帽时间18分钟。