[发明专利]大肠杆菌外膜蛋白TolC核酸适配体的序列及用途

权利要求书

1.特异结合大肠杆菌外膜蛋白TolC的核酸适配体，所述核酸适配体如SEQ ID NO：4所示序列。

2.按权利要求1所述的适配体，其特征在于，所述大肠杆菌外膜蛋白TolC采用如下方法纯化得到：

采用分子克隆技术，根据大肠杆菌外膜蛋白TolC的基因组序列设计特异引物，所述特异引物之上游引物Pa为5’-CGGGATCCATGAAGAAATTGCTCCCCATTCTT‐3’，其下游引物Pb为5’‐CCGCTCGAGGTTACGGAAAGGGTTATGACCGTT‐3’，以全长cDNA为模板，PCR扩增，得到目的基因经Bam H I和Xho I双酶切，同样处理PET-30a质粒，再用T4连接酶连接制得含有TolC基因的重组质粒；重组质粒转化感受态细胞BL21，从转化的平板挑单克隆到液体培养基中培养，IPTG诱导表达，经固液分离，取沉淀经超声粉碎，然后电泳；再采用柱层析纯化所述大肠杆菌外膜蛋白TolC。

3.按权利要1或2所述的适配体，其特征在于，所述序列为人工合成的序列，或任何其他来源的同样的序列。

4.一种权利要求1-3中任一项所述的适配体在制备大肠杆菌外排泵抑制剂中的应用。

5.一种权利要求1-3中任一项所述的适配体在制备检测TolC蛋白的探针或靶点中的应用。

6.一种权利要求1所述的适配体在制备大肠杆菌外排泵抑制剂或制备检测TolC蛋白的探针或靶点中的应用。