[发明专利]一种利用米氏硫胺素芽孢杆菌DY3菌株沤麻制备黄麻纤维的方法在审
申请号: | 201410333923.9 | 申请日: | 2014-07-14 |
公开(公告)号: | CN104293693A | 公开(公告)日: | 2015-01-21 |
发明(设计)人: | 丁若垚;郭营;郁崇文;张兴群 | 申请(专利权)人: | 东华大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;D01C1/04;C12R1/01 |
代理公司: | 上海泰能知识产权代理事务所 31233 | 代理人: | 黄志达 |
地址: | 201620 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 硫胺素 芽孢 杆菌 dy3 菌株 制备 黄麻 纤维 方法 | ||
技术领域
本发明属于沤麻领域,特别涉及一种利用米氏硫胺素芽孢杆菌DY3菌株沤麻制备黄麻纤维的方法。
背景技术
麻是纺织原料之一,其品种主要有亚麻、苎麻、大麻、红麻、黄麻、罗布麻、剑麻、蕉麻、荨麻和苘麻等。麻纤维是从各种麻植物取得的纤维的统称,具有吸湿、透气、散热和抗菌等其他天然纤维无法比拟的优点。我国作为世界上麻类资源最丰富的国家之一,每年生产的麻纤维及其制品除满足国内市场的需求,还作为大宗商品出口美国、西欧及东南亚国家,年均创汇近百亿美元。在国家节能减排政策和消费者回归自然、追求绿色的消费观念推动下,麻类纤维绿色加工技术已经成为纺织领域的研究热点。
沤麻利用细菌和水分对植物的作用,溶解或腐蚀包围在韧皮纤维束外面的大部分蜂窝状结缔组织和胶质,从而促使纤维与麻茎分离的加工过程。在广泛应用的水沤法中,麻茎浸没在水中,水渗透到麻茎的中央部分,使内部细胞膨胀,胀破最外层,从而增加对水分和细菌的吸收。沤麻法是生产优质纤维的加工工艺,沤麻过程的菌种选择是沤麻的关键。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种利用米氏硫胺素芽孢杆菌DY3菌株沤麻制备黄麻纤维的方法,该方法简单、生产流程短、适合大规模工业化生产。
本发明的一种利用米氏硫胺素芽孢杆菌DY3菌株沤麻制备黄麻纤维的方法,包括:
(1)将保存的米氏硫胺素芽孢杆菌DY3菌株于牛肉膏蛋白胨培养基中培养,添加冻存缓冲液;
(2)在黄麻麸皮培养基中接入步骤(1)所得的菌一环,摇瓶培养;菌一环的加入量为每1000ml菌液加入200mg;
(3)将步骤(2)所得的培养基接种入黄麻麸皮发酵培养基,摇瓶培养得到发酵菌液;
(4)制作沤麻池;
(5)将步骤(3)中制备的发酵菌液使用喷淋法送入沤麻池做沤麻处理,沤麻后制得黄麻纤维。
所述步骤(1)中的米氏硫胺素芽孢杆菌DY3菌株的16Sr DNA序列如SEQ ID NO:1所示。
所述步骤(1)中的牛肉膏蛋白胨培养基的组成为:每1000ml培养基包括牛肉膏3g、蛋白胨10g、氯化钠5g和水1000ml。
所述步骤(1)中的冻存缓冲液的组成为:每100ml冻存缓冲液包括甘油50ml和水50ml;加入量为每1000ml菌液加入1ml。
所述步骤(1)中的菌株保存条件为-80℃,pH自然;培养条件为37℃,pH自然,培养时间12小时。
所述步骤(2)中的黄麻麸皮培养基的组成为:每1000ml培养基包括黄麻皮200g,麸皮50g,麦芽汁50ml和水950ml;步骤(3)中的黄麻麸皮发酵培养基的组成为:每1000ml培养基包括黄麻皮100g,麸皮100g,麦芽汁200ml和水800ml,接种量为每1000ml菌液接种入30L黄麻麸皮发酵培养基。
所述步骤(2)和(3)中的培养条件为37℃,pH自然,培养时间24小时。
所述步骤(4)中的沤麻池的麻趟间距为15-20厘米,麻层厚度为2-2.5厘米。
所述步骤(5)中的沤麻条件为自然温度(约20-30摄氏度),pH自然,沤麻时间10-20天;喷淋法的工艺具体为每48小时向沤麻区域喷洒菌液6~10ml。
所述步骤(5)中的制得的黄麻纤维应用于制作麻袋、麻布、造纸、绳索、织地毯或窗帘。
本发明所采用的米氏硫胺素芽孢杆菌(Aneurinibacillus migulanus)DY3菌株的保藏号为CGMCC No.9121,保藏日为2014年5月4日,建议分类命名为:米氏硫胺素芽孢杆菌(Aneurinibacillus migulanus),保藏单位名称:CGMCC中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。
根据16sR DNA测序Blast及聚类分析结果,该菌与米氏硫胺素芽孢杆菌相似性为99%,结合镜检分析,命名此菌株为米氏硫胺素芽孢杆菌(Aneurinibacillus migulanus)DY3菌株。16S rDNA测序中,所采用的正向引物27F,反向引物1492R,均为国际通用引物,由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。
该菌株培养条件粗放,耐热性好,生长繁殖快,可以有效去除黄麻纤维中的非纤维素胶质,且酶活稳定,菌、酶均无毒性。该菌株及培养系统能够直接用于黄麻沤麻。
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