[发明专利]尤韦可拟盘多毛孢代谢产物在制备抗肿瘤药物中的应用在审
| 申请号： | 201410335854.5 | 申请日： | 2014-07-15 |
| 公开（公告）号： | CN104161777A | 公开（公告）日： | 2014-11-26 |
| 发明（设计）人： | 钱一鑫;康冀川;王鲁 | 申请（专利权）人： | 贵州大学 |
| 主分类号： | A61K36/06 | 分类号： | A61K36/06;A01N63/04;C12N1/14;A61P35/00;A01P3/00 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 谷庆红 |
| 地址： | 550025 贵州省贵阳市*** | 国省代码： | 贵州;52 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 尤韦可拟盘多毛孢 代谢 产物 制备 肿瘤 药物 中的 应用 | ||
1.尤韦可拟盘多毛孢(Pestalotiopsisuvicola)GMH31代谢产物在制备抗肿瘤药物中的应用，所述的尤韦可拟盘多毛孢GMH31在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏登记号为CCTCCNO:M2014303。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于：所述代谢产物按以下方法制备：
(1)菌种的活化培养：将分离保存的尤韦可拟盘多毛孢GMH31菌种移至马铃薯葡萄糖PDA固体平板上，在28±1℃条件下培养，至菌丝覆盖整个培养皿，用直径为7mm打孔器打孔获得菌饼，供接种用；
(2)液体发酵培养：发酵培养液为每1000mL中含有玉米粉10g、甘露醇20g、葡萄糖20g、酵母膏5g、蛋白胨10g、KH2PO40.5g、CaCO315g、MgSO4·7H2O0.3g，每500mL三角瓶装发酵培养液100mL；配制后121℃灭菌20min，待冷却至40℃在无菌条件下挑取1直径为7mm菌饼，在28±1℃条件下，静置发酵培养28-35天；
(3)菌丝体提取：发酵完毕后收集菌丝体，加入浓度为30-90％丙酮水溶液，使菌丝体在丙酮水溶液中的浓度小于等于0.50g/L，在功率为40KHz、30min/次的条件下超声萃取2-5次，然后在同等条件下再加入等体积乙酸乙酯超声萃取2-5次，过滤，收集上层乙酸乙酯溶液，在真空条件下浓缩至浸膏，得乙酸乙酯菌丝体萃取物。
3.如权利要求1所述的应用，其特征在于：所述代谢产物按以下方法制备：
(1)菌种的活化培养：将分离保存的尤韦可拟盘多毛孢GMH31菌种移至马铃薯葡萄糖PDA固体平板上，在28±1℃条件下培养，至菌丝覆盖整个培养皿，用直径为7mm打孔器打孔获得菌饼，供接种用；
(2)液体发酵培养：发酵培养液为每1000mL中含有玉米粉10g、甘露醇20g、葡萄糖20g、酵母膏5g、蛋白胨10g、KH2PO40.5g、CaCO315g、MgSO4·7H2O0.3g，每500mL三角瓶装发酵培养液100mL；配制后121℃灭菌20min，待冷却至40℃在无菌条件下挑取1直径为7mm菌饼，在28℃条件下，静置发酵培养30天；
(3)菌丝体提取：发酵完毕后收集菌丝体，加入浓度为80％丙酮水溶液，使菌丝体在丙酮水溶液中的浓度小于等于0.50g/L，在功率为40KHz、30min/次的条件下超声萃取3次，然后在同等条件下再加入等体积乙酸乙酯超声萃取3次，过滤，收集上层乙酸乙酯溶液，在真空条件下浓缩至浸膏，得乙酸乙酯菌丝体萃取物。
4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述肿瘤细胞为小鼠腹水型肝癌细胞H22、小鼠腹水型宫颈癌细胞U14或小鼠腹水型肉瘤细胞S180。
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