[发明专利]一种从香露兜挥发性成分中测定角鲨烯含量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及化学分析技术领域，尤其涉及一种从香露兜挥发性成分中测定角鲨烯含量的方法。

背景技术

香露兜叶系露兜树科露兜属香露兜(Pandanus amaryllifolius Roxb)的新鲜叶片(别名：香兰叶、板兰香、斑兰叶等)。香露兜为常绿草本，叶长约30cm，宽约1.5cm，叶缘偶见微刺，叶尖刺稍密，叶背面先端有微刺，叶鞘有窄白膜，花果未见。原产地为印尼马古鲁群岛。研究发现，香露兜适应我国南部酸性赤红壤，但因受温度限制，仅适合在我国亚热带南缘至热带区域生长。

角鳖烯是天然的链状三萜化合物，是重要的天然活性物质，主要的来源依然是深海鱼类，在植物中的分布也十分广泛，但含量不高。如在橄榄果实、棕榈果实的植物油中含量相对较高，而在其它植物油亦可检测到，但含量一般都很低。

任竹君等采用水蒸气蒸馏(SD)法、尹桂豪等分简单地采用超临界CO₂萃取(SFE-CO₂)法进行提取，通过气相色谱质谱(GC-MS)联用分析法对香露兜叶挥发油化学成分研究，结果均鉴定出相对含量较高的角鲨烯，分别为21.03％、4.229％。

Tan M.A.等在同科属植物露兜树(Pandanus tectorius Soland.var.laevis)叶中提取分离得到了角鲨烯化合物，并通过MABA试验表明其具有抗结核作用的生物活性。

至今为止，对香露兜挥发性成分系统地分析报道也甚少。因此非常有必要对香露兜挥发性成分进行深入地提取分离、系统地定性定量分析，为进一步开发香露兜叶更广的应用价值提供了一定的实验依据。

发明内容

本发明提供了一种从香露兜挥发性成分中测定角鲨烯含量的方法。

本发明采用如下技术方案：

本发明的从香露兜挥发性成分中测定角鲨烯含量的方法采用高效液相色谱法进行测定，流动相：甲醇，流速0.8-1.2ml/min；检测波长：204nm；柱温：25-35℃；检测时间：30min；进样量：10μl。

流动相的流速优选为1.0ml/min。

柱温优选：30℃。

本发明的积极效果如下：

本发明的从香露兜挥发性成分中测定角鲨烯含量的方法中，进样量与其峰面积积分值呈良好的线性关系，样品稳定性、仪器精密度、方法重现性以及方法专属性均符合要求，为以后角鲨烯快速、准确定量奠定了基础。

附图说明

图1是角鲨烯对照品溶液光谱图。

图2是角鲨烯供试品溶液光谱图。

图3是香露兜超临界提取物供试品色谱图。

图4是角鲨烯对照品色谱图。

图5是空白对照色谱图。

图6是角鲨烯标准曲线图。

具体实施方式

下面的实施例是对本发明的进一步详细描述。

实施例1

1仪器与材料

1.1仪器

DIONEX3000型高效液相色谱(HPLC)仪，DAD检测器、Chromeleon色谱工作站(美国戴安公司)；

AL104型电子天平(梅特勒-托利多上海仪器有限公司)；

XS205DualRange型电子天平(梅特勒-托利多上海仪器有限公司)；

HN-1006型超声波清洗机(广州市华南超声设备有限公司)；

HK-08B型流水式中药粉碎机(广州市旭朗机械设备有限公司)；

国家标准检验筛(浙江飞达金属砂筛厂)

1.2材料

甲醇(HPLC级,Merck有限公司)；

角鲨烯对照品(140721-200601，中国食品药品检定研究院供鉴别与含量测定，含量99.5％)；

CO₂(食品级，纯度>99.95％，购自佛山市顺德区佛伦气体有限公司)；香露兜叶(批号：20130114B，2013年1月购于海南省万宁市兴隆华侨农场，经鉴定为香露兜(Pandanus amaryllfoliu Roxb)的新鲜叶。

2方法与结果

2.1对照品溶液制备

取角鲨烯对照品约0.01g，精密称定，加甲醇溶解，并定容至5ml棕色量瓶中，作为角鲨烯对照品贮备液。

精密移取角鲨烯对照品贮备液3ml，置25ml棕色量瓶中，加入甲醇稀释至刻度，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，作为角鲨烯对照品溶液。

2.2供试品溶液制备