[发明专利]一种螺二萘类化合物及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及从喜树来源植物内生真菌Lasiodiplodia pseudotheobromae发酵液中提取分离得到的一种新的螺二萘类化合物及其制备方法及其在制备人急性早幼粒白血病细胞株HL-60抑制剂中的用途。

背景技术

螺二萘类化合物是一类结构独特的天然产物，文献报道其主要从植物内生真菌Nattrassia mangiferae、海洋真菌Ascochyta sp.NGB4以及一些植物的茎干如Jatropha curcas和Bruguiera gymnorrhiza中分离得到，而本发明所涉及的真菌Lasiodiplodia pseudotheobromae代谢产物中尚未有该类化合物的报道。

根据文献记载，该类化合物具有抗肿瘤、抗菌、免疫抑制等作用。例如从Nattrassia mangiferae中分离得到的Sch 50673和Sch 50676对人纤维肉瘤细胞HT1080具有细胞毒作用，其IC₅₀值分别为6.2和2.8μM；从海洋真菌Ascochyta sp.NGB4中分得的Ascochytatin对人肺癌细胞A549和白血病Jurkat细胞均表现出明显的生长抑制作用，其IC₅₀值分别为4.8和6.3μM，且其具有非常强的抗革兰氏阳性菌和白色念珠菌的作用；从植物Bruguiera gymnorrhiza的茎干中分离得到的palmarumycin BG5对人乳腺癌细胞MCF-7和人白血病细胞HL-60均具有强的细胞毒作用，其IC₅₀值分别为7.6和3.1μM。本发明所涉及的螺二萘类化合物迄今在国内外尚未见有相关专利或文献报道。

发明内容

本发明提供一种从喜树植物内生真菌Lasiodiplodia pseudotheobromae发酵液中提取分离的新螺二萘类化合物，其结构如式I所示：

本发明还提供所述化合物在制备治疗白血病药物中的应用。

本发明的制备技术方案包括如下步骤：

将分离自四川攀枝花喜树植物树枝部分的内生真菌Lasiodiplodia pseudotheobromae进行大量发酵，发酵产物经过滤得到发酵液和菌丝体。发酵液经浓缩后，用乙酸乙酯萃取；菌丝体用80％丙酮水溶液超声提取，浓缩除去丙酮后，再用乙酸乙酯萃取。将发酵液乙酸乙酯萃取物和菌丝体乙酸乙酯萃取物合并后，经硅胶柱色谱，用体积配比为100:0-0:100的二氯甲烷-甲醇或三氯甲烷-甲醇溶液进行梯度洗脱，其中二氯甲烷-甲醇体积配比为100:1-100:2的洗脱物再经Sephadex LH-20凝胶柱色谱，用甲醇-水洗脱，并经半制备ODS高效液相色谱进行纯化，以体积配比为70:30-50:50的甲醇-水溶液为流动相洗脱，得式I化合物。