[发明专利]一种昆仑血菊查耳酮化合物的制备方法及应用

说明书

技术领域

本发明属于天然化合物提取分离领域，具体涉及一种昆仑血菊查耳酮化合物及其制备方法和应用。

背景技术

流行病学研究持续表明，由自由基失衡导致的氧化应激是导致人体各种心血管疾病如高血压、高血脂和癌症等疾病的主要原因，因此，人体补充一定量的抗氧化剂为清除体内过量的自由基对维护人体健康是非常必要的。食品工业生产中常用的人工合成的抗氧化剂如二叔丁基对甲酚、叔丁基对苯二酚等具有显著的抗氧化效果，但是使用量有严格限制，且过量使用常常具有一定副作用。所以，从各种植物中寻找高效无副作用的天然抗氧化剂，为了保护人体免受自由基的损伤并且预防慢性疾病的发生，一直是现代食品生产与药物开发的重要研究内容之一。

昆仑雪菊又称血菊，学名蛇目菊(Coreopsis tinctoria Nutt)，是一种小型具有芳香性的一年生菊科植物，蛇目菊属，学名蛇目菊、双色金鸡菊，原产于北美，现在在世界范围内广为种植,分为栽培型和野生型两类。在我国新疆，人工种植的雪菊分布较广，但野生雪菊主要分布在新疆和田喀喇昆仑山脉海拔3000米以上高寒山区，是新疆唯一与雪莲齐名的高寒植物。其头状花序经晒干后，当地少数民族常泡茶饮用，经世代传承，发现其具有治疗多种疾病的功效，如降血压、抗病毒、抗衰老、抗炎、抗肿瘤等。

目前对昆仑雪菊的研究大都集中在对其粗提物活性的研究方面，如降血压、降血脂、降血糖等，而对雪菊的化学成分，特别是其中的有机植物化学成分的研究，研究国内外鲜有报道，且少量的有机化学成分报道大多仅限于对游离化合物的研究，而忽略了结合型化合物的研究。据报道，结合型黄酮主要通过酯键、醚键、缩醛键与细胞壁构成材料－膳食纤维结合、能耐受肠道消化酶不被降解并最终穿过胃肠道到达结肠，结肠含有的大量细菌菌群可以发酵降解这些物质，降解产物能够中和氧化剂、维持肠道菌落的生长，从而为维持肠胃健康起到重要作用。因此，现有对雪菊植物化学成分的研究由于没有考虑到结合型化合物而低估了总有效成分的含量。所以，对结合型化合物的研究对全面揭示昆仑雪菊的功效成分、营养价值与药理作用具有重要意义。

发明内容

本发明利用现代分离技术和现代波谱学技术对昆仑雪菊进行化学成分研究，从中得到一个新的查耳酮糖苷类化合物，鉴定了其结构，活性测定结果表明该化合物具有显著的抗氧化活性，可作为昆仑雪菊中具有抗氧化活性的标志性成分。

本发明的目的可以通过以下措施达到：

一种结构独特的查耳酮糖苷新化合物,即α,3,2'-三羟基-4'-O-β-D-吡喃葡萄糖查耳酮(α,3,2'-trihydroxy-4'-O-β-D-glucopyranosylchalcone)，命名为Coretincone，结构式如式(Ⅰ)所示：

本发明的式(I)化合物的一种制备方法如下：以干燥的雪菊头状花序为原料，将其粉碎后，用甲醇进行多次萃取，然后过滤去除滤液，滤渣用NaOH溶液于40～60℃下降解，然后用盐酸中和至中性，再加入正丁醇萃取多次，取正丁醇层浓缩后得到正丁醇粗取物，将正丁醇萃取物反复经过硅胶柱层析，在硅胶柱层析过程中辅以Sephadex LH-20柱层析，分离纯化得到式(I)化合物。

在制备方法中，昆仑雪菊头状花序与萃取用甲醇的重量体积比为优选1：8～10(kg:L)，用甲醇萃取昆仑雪菊头状花序3-5次。NaOH溶液的浓度优选为1～3mol·L^-1，降解温度优选为35～55℃，降解时间为1～3h。萃取用正丁醇与原料昆仑雪菊头状花序的体积重量比为3～5：1(kg:L)，用正丁醇萃取3次。

在制备方法中，一种正丁醇萃取物的反复层析步骤包括：正丁醇提取物先用硅胶常压柱进行两次层析分离后，再用Sephadex LH-20柱层析纯化，最后用常压硅胶柱层析分离，得到式(I)化合物。其中正丁醇提取物先用硅胶常压柱进行两次层析分离时，首次用石油醚-丙酮-甲醇(100:0:0-0:100:0-0:0:100)进行梯度洗脱，后一次用氯仿-甲醇(体积比100:1)进行梯度洗脱；Sephadex LH-20柱层析的洗脱液为氯仿-甲醇(体积比1:1)；最后一次常压硅胶柱的洗脱液为氯仿-甲醇体积比50:1。

本发明还包括式(I)化合物的药学上可接受的盐。