[发明专利]包裹载药白蛋白纳米粒的脂质超声微泡及其制备方法

说明书

【技术领域】

本文涉及一种中间包裹载药白蛋白纳米粒和气体的脂质微泡及其制备方法。

【背景技术】

随着超声显影技术的发展，人们发现微泡能够显著改善超声图像的对比质量，由此发展出中间含气的超声微泡作为超声造影剂。超声造影剂可增强心肌、肝、脑等实质器官的二维超声显像和血流多普勒效应，可明显提高超声对于病变区形态的分辨能力。

纳米药物载体是目前药物制剂研究中的热点。纳米粒在药物传递方面具有以下优点：具有相对较高的载药量和包封率，可提高靶位的血药浓度，延长药物在靶位的作用时间，减少药物降解，提高药物稳定性，并且纳米粒具有EPR效应，利于传递药物进入肿瘤等病变组织。然而靶向纳米粒的发展遇到一些问题，如靶向效率仍不够理想，靶向分子和纳米载体的连接效率较低。

载药超声微泡给药系统是一种极具潜力的新型给药系统。该方法由载药微泡系统和超声控释系统构成。其原理是将载药微泡经静脉注射后，体表采用超声辐射，使微泡定向爆破，在体内靶部位释放药物。同时微泡的爆破可以造成“声孔效应”，增强局部微血管和细胞膜通透性，促进药物渗透，从而实现药物的靶向给药。但目前仍然存在技术难题：微泡作为药物载体，微泡中心为气体，外壳为脂质膜，因而其载药量较低，造成输送到靶位的药物浓度较低，对大多数药物来说不足以产生有效的药理作用。目前载药微泡仅适用于少量药效较强的药物。

【发明内容】

本法明目的在于针对脂质微泡药物包封率和载药量低以及纳米粒靶向效率低的问题，提供一种新的中间同时包裹载药白蛋白纳米粒和气体的脂质微泡的制备方法。该新型包裹载药白蛋白纳米粒的微泡可大大提高微泡的载药量，并且该微泡可在体外超声定位辐照下被击破，释放载药白蛋白纳米粒于靶位，大大提高靶向给药效率。

本发明的目的通过以下技术解决方案实现：

步骤1，配制0.5％～6％的白蛋白水溶液，另配制药物的乙醇溶液，将药物的乙醇溶液以0.1～5mL/min的速度滴加到白蛋白水溶液中，加入一定量戊二醛，搅拌固化，旋转蒸发除去乙醇，即得载药白蛋白纳米粒混悬液。

步骤2，将磷脂、甘油和磷酸盐缓冲液按比例混合并加热。在加热培养之前加入适量步骤1中制得的白蛋白纳米粒混悬液。充入氟碳气振荡2-200s，制得包裹载药白蛋白纳米粒的脂质微泡。

在步骤2中通过机械振荡法制得的微泡，内部包含气体和载药白蛋白纳米粒，其直径分布范围为4到6微米。

本发明所得的微泡可静注用于临床，或者采用本领域公认的方法制备成粉剂或冻干剂给药。

与将纳米粒吸附或连接于微泡表面的系统相比，本发明首次制备包裹载药白蛋白纳米粒的脂质微泡，将载药白蛋白纳米粒包裹于微泡脂膜内部。制备工艺简单，易于工业化，制备过程不涉及化学反应，未采用毒性大的有机溶剂。

本专利首次制备的包裹载药白蛋白纳米粒的脂质微泡可在体表超声辐照下在体内精确定位爆破，释放出其包裹的白蛋白纳米粒，从而提高纳米粒的靶向给药效率。采用微泡包裹载药纳米粒的方法可显著提高微泡的载药量，降低药物的降解，实现药物在靶位的缓释，延长药物作用时间，增加了药物的疗效。

附图说明：

图1为本发明实例1所制备的载氟碳气的脂质微泡的100倍下光镜照片

图2为本发明实施例1所制备的载姜黄素白蛋白纳米粒脂质微泡的光学显微镜(400倍)下的图像。

图3为本发明制备的载姜黄素白蛋白纳米粒和氟碳气的脂质微泡的示意图

图4为本发明制备的包载姜黄素白蛋白纳米粒和氟碳气的脂质微泡的粒径分析图

图5为本发明制备的包载姜黄素白蛋白纳米粒和氟碳气的脂质微泡的体外显影图

图6为本发明制备的包载姜黄素白蛋白纳米粒和氟碳气的脂质微泡的兔肝脏显影图

图7为本发明制备的包载姜黄素白蛋白纳米粒和氟碳气的脂质微泡在超声前后的体外释放情况。

具体实施方式：

以下通过实施例对本发明进行详细描述，但本发明并不仅限于下述实施例。

实施例1

1、载氟碳气的卵磷脂微泡的制备

将卵磷脂、甘油和磷酸盐缓冲液混合并加热，甘油与磷酸盐缓冲液的质量体积比为58.1％。卵磷脂与磷酸盐缓冲液的质量体积比为6.1％。充入氟碳气振荡40-50s，制得空白的脂质微泡。

2、基于Nanoparticle albumin-bound技术制备姜黄素白蛋白纳米粒