[发明专利]一种用于评估何首乌特异质肝毒性的方法有效
申请号: | 201410342579.X | 申请日: | 2014-09-10 |
公开(公告)号: | CN105463061B | 公开(公告)日: | 2019-02-26 |
发明(设计)人: | 王伽伯;肖小河;李春雨;马致洁;赵艳玲;柏兆方 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军第三〇二医院 |
主分类号: | C12Q1/52 | 分类号: | C12Q1/52 |
代理公司: | 北京安信方达知识产权代理有限公司 11262 | 代理人: | 苏蕾;高瑜 |
地址: | 100039 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 评估 何首乌 特异 毒性 方法 | ||
1.一种用于检测何首乌特异质肝毒性的方法,所述方法包括下述步骤:
a.何首乌溶液的制备
制备何首乌的干燥提取物,计算收率;
测试时,按照何首乌的给药剂量计算所需干燥提取物的量,采用无菌蒸馏水溶解,贮存,备用;
b.内毒素溶液的制备
按照内毒素的给药剂量计算所需内毒素的量,采用无菌蒸馏水溶解,贮存,备用;
其中所述内毒素为细菌脂多糖;
c.动物实验
将大鼠随机分组,实验前称重并记录,通过灌胃给予大鼠所述何首乌溶液,且在给予所述何首乌溶液2~5小时后,向大鼠尾静脉注射内毒素溶液,然后,麻醉大鼠,下腔静脉取血,离心,采集血浆标本;
在动物实验中,何首乌给药剂量为0.54g/kg~75.6g/kg,内毒素的给药剂量为1.4mg/kg~5.6mg/kg;
d.检测指标
用酶标仪法检测血浆标本的肝功能指标血清丙氨酸氨基转氨酶ALT和天冬氨酸氨基转氨酶AST;
e.统计学处理
采用SPSS软件对ALT和AST进行统计分析,计量资料采用单因素方差分析,P<0.05为有统计学意义。
2.根据权利要求1所述的方法,其中,所述干燥提取物通过以下制备:
称取何首乌的饮片,加入体积百分数为50%的乙醇冷浸提取,其中乙醇的以毫升计的体积为所述何首乌饮片的以克计的重量的8倍,冷浸提取2次,每次48h,合并提取液,减压浓缩回收尽乙醇,真空干燥,得到干燥粗提物。
3.根据权利要求1所述的方法,其中,步骤a和步骤b中的贮存是在4℃下贮存。
4.根据权利要求1所述的方法,其中,使用戊巴比妥钠麻醉大鼠。
5.根据权利要求1所述的方法,其中,在动物实验中,何首乌给药剂量为1.08g/kg~50.4g/kg。
6.根据权利要求1所述的方法,其中,在动物实验中,内毒素的给药剂量为1.4mg/kg~2.8mg/kg。
7.根据权利要求1所述的方法,其中,在动物实验中,在给予何首乌溶液2~4小时后,向大鼠尾静脉注射内毒素溶液。
8.根据权利要求1所述的方法,其中,在动物实验中,在注射内毒素溶液7~10小时后,麻醉大鼠。
9.根据权利要求8所述的方法,其中,在动物实验中,在注射内毒素溶液7~9小时后,麻醉大鼠。
10.根据权利要求1所述的方法,其中,实验所用的大鼠为Wistar大鼠、SD大鼠或F344大鼠。
11.根据权利要求10所述的方法,其中,实验所用的大鼠为SD大鼠。
12.根据权利要求11所述的方法,其中,所述SD大鼠的体重为150g~300g。
13.根据权利要求12所述的方法,其中,所述SD大鼠的体重为200g~250g。
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