[发明专利]一种用于评估何首乌特异质肝毒性的方法有效

专利信息
申请号: 201410342579.X 申请日: 2014-09-10
公开(公告)号: CN105463061B 公开(公告)日: 2019-02-26
发明(设计)人: 王伽伯;肖小河;李春雨;马致洁;赵艳玲;柏兆方 申请(专利权)人: 中国人民解放军第三〇二医院
主分类号: C12Q1/52 分类号: C12Q1/52
代理公司: 北京安信方达知识产权代理有限公司 11262 代理人: 苏蕾;高瑜
地址: 100039 北*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 用于 评估 何首乌 特异 毒性 方法
【权利要求书】:

1.一种用于检测何首乌特异质肝毒性的方法,所述方法包括下述步骤:

a.何首乌溶液的制备

制备何首乌的干燥提取物,计算收率;

测试时,按照何首乌的给药剂量计算所需干燥提取物的量,采用无菌蒸馏水溶解,贮存,备用;

b.内毒素溶液的制备

按照内毒素的给药剂量计算所需内毒素的量,采用无菌蒸馏水溶解,贮存,备用;

其中所述内毒素为细菌脂多糖;

c.动物实验

将大鼠随机分组,实验前称重并记录,通过灌胃给予大鼠所述何首乌溶液,且在给予所述何首乌溶液2~5小时后,向大鼠尾静脉注射内毒素溶液,然后,麻醉大鼠,下腔静脉取血,离心,采集血浆标本;

在动物实验中,何首乌给药剂量为0.54g/kg~75.6g/kg,内毒素的给药剂量为1.4mg/kg~5.6mg/kg;

d.检测指标

用酶标仪法检测血浆标本的肝功能指标血清丙氨酸氨基转氨酶ALT和天冬氨酸氨基转氨酶AST;

e.统计学处理

采用SPSS软件对ALT和AST进行统计分析,计量资料采用单因素方差分析,P<0.05为有统计学意义。

2.根据权利要求1所述的方法,其中,所述干燥提取物通过以下制备:

称取何首乌的饮片,加入体积百分数为50%的乙醇冷浸提取,其中乙醇的以毫升计的体积为所述何首乌饮片的以克计的重量的8倍,冷浸提取2次,每次48h,合并提取液,减压浓缩回收尽乙醇,真空干燥,得到干燥粗提物。

3.根据权利要求1所述的方法,其中,步骤a和步骤b中的贮存是在4℃下贮存。

4.根据权利要求1所述的方法,其中,使用戊巴比妥钠麻醉大鼠。

5.根据权利要求1所述的方法,其中,在动物实验中,何首乌给药剂量为1.08g/kg~50.4g/kg。

6.根据权利要求1所述的方法,其中,在动物实验中,内毒素的给药剂量为1.4mg/kg~2.8mg/kg。

7.根据权利要求1所述的方法,其中,在动物实验中,在给予何首乌溶液2~4小时后,向大鼠尾静脉注射内毒素溶液。

8.根据权利要求1所述的方法,其中,在动物实验中,在注射内毒素溶液7~10小时后,麻醉大鼠。

9.根据权利要求8所述的方法,其中,在动物实验中,在注射内毒素溶液7~9小时后,麻醉大鼠。

10.根据权利要求1所述的方法,其中,实验所用的大鼠为Wistar大鼠、SD大鼠或F344大鼠。

11.根据权利要求10所述的方法,其中,实验所用的大鼠为SD大鼠。

12.根据权利要求11所述的方法,其中,所述SD大鼠的体重为150g~300g。

13.根据权利要求12所述的方法,其中,所述SD大鼠的体重为200g~250g。

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