[发明专利]鸭疱疹病毒1型UL7截短重组蛋白及其制备方法和应用有效
申请号: | 201410347473.9 | 申请日: | 2014-07-21 |
公开(公告)号: | CN104072591A | 公开(公告)日: | 2014-10-01 |
发明(设计)人: | 汪铭书;程安春;黄杰;贾仁勇;杨乔;孙昆峰;陈舜;刘马蜂;朱德康;陈孝跃 | 申请(专利权)人: | 四川农业大学 |
主分类号: | C07K14/03 | 分类号: | C07K14/03;C07K16/08;C12N15/38;C12N15/70;C12N1/21;C12P21/02;G01N33/68;G01N33/569 |
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地址: | 611130 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 疱疹病毒 ul7 重组 蛋白 及其 制备 方法 应用 | ||
1.鸭疱疹病毒1型UL7截短重组蛋白,其特征在于,氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。
2.权利要求1所述的鸭疱疹病毒1型UL7截短重组蛋白的编码基因。
3.如权利要求2所述的编码基因,其特征在于,核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
4.含有权利要求2或3所述编码基因的重组表达载体。
5.含有权利要求4所述重组表达载体的工程菌。
6.如权利要求5所述的工程菌,其特征在于,是将重组表达载体转入大肠杆菌BL21pLysS中而得到,所述重组表达载体是将核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的鸭疱疹病毒1型UL7截短重组蛋白的编码基因克隆入原核表达质粒pET-32a(+)中而得到。
7.利用权利要求6所述工程菌制备鸭疱疹病毒1型UL7截短重组蛋白的方法,其特征在于,包括以下步骤:将工程菌接入含氨苄青霉素的LB液体培养基中,37℃振荡培养至OD600达0.6,加入IPTG至终浓度为0.3mmol,37℃诱导培养3小时,收集菌液,离心,沉淀用20mmol pH8.0的Tris-HCl缓冲液悬浮,加入溶菌酶至终浓度为1mg/mL,置-20℃过夜后,在冰浴条件下超声波间歇破碎菌体,离心,沉淀洗涤后,用8mol/L尿素溶液溶解,经孔径0.45μm的微孔滤膜过滤,透析复性,即得鸭疱疹病毒1型UL7截短重组蛋白。
8.权利要求1所述的鸭疱疹病毒1型UL7截短重组蛋白的多克隆抗体。
9.权利要求1所述的鸭疱疹病毒1型UL7截短重组蛋白在制备检测鸭疱疹病毒1型抗体的试剂中的应用。
10.权利要求8所述的鸭疱疹病毒1型UL7截短重组蛋白的多克隆抗体在制备检测鸭疱疹病毒1型抗原和/或UL7蛋白在鸭疱疹病毒1型感染宿主细胞中的定位和分布的试剂中的应用。
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