[发明专利]一种用于检测HE4的酶联免疫试剂盒

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种用于检测HE4(人附睾蛋白4)的酶联免疫试剂盒。

背景技术

卵巢癌是妇科常见的恶性肿瘤，也是妇科肿瘤死亡率最高的肿瘤类型，每年约为25％即每四个卵巢癌患者中就有一人死亡。据估计，中国每年每10万人中就有五人被诊断为新发卵巢癌。卵巢癌通常表现为附件肿块，因临床症状不明显，容易造成漏诊与误诊。因此，超过70-75％的卵巢癌患者确诊时已处于癌症晚期，并已扩散到其他器官，错过了最佳治疗时机。在女性的一生中，每五位女性就会有一位出现盆腔肿块，需要接受检查来排除恶性肿瘤的可能性。近20年来，卵巢癌的5年生存率一直徘徊在较低水平，5年内的复发率高达80％，且复发时间主要集中在治疗期的3年内。尽管卵巢癌的预后较差，但如果卵巢癌能被尽早诊断，癌细胞仅在于卵巢内，患者的存活率可以提高到75-95％，极有可能被治愈。因此，卵巢癌的早期诊断和治疗监测尤为重要。

目前，卵巢癌的诊断主要依据两种检测手段。一种是经阴道超声检查(TUV)。这种成像方法可用于检查女性的生殖器官，包括子宫、卵巢、宫颈及阴道。尽管其应用较为普遍，但是这种方法并不能准确检测出该肿块是良性还是恶性。此外，该方法还需要经验丰富的临床技师对检测结果进行解读。另一种常规检测方法是检测生物标志物CA125，这种方法被视为卵巢癌诊断的“金标准”。但是，CA125的特异性及敏感度较低，容易出现假阴性或假阳性。大约50％的卵巢癌I期患者并没有CA125水平升高的现象，也就是说有一半的卵巢癌患者可能被漏诊。某些良性卵巢疾病也会导致CA125水平升高，造成假阳性。因此，在临床诊断上亟需一种更好的诊断工具以尽早诊断卵巢癌。

人附睾蛋白4，即HE4是1991年在人的附睾中被偶然发现的。1999年，发 现HE4在卵巢癌组织中呈过度表达。2002年，证实HE4可以作为卵巢癌的血清标志物，2007年通过了试剂研发。2008年研究证明HE4可以作为卵巢癌的检测，并在同年通过了美国FDA的批准。2011年，FDA通过批准了ROMA(恶性风险计算方法)指数，用来分析卵巢癌的风险评估。HE4水平与年龄有关，年龄越大它的水平就越高。健康女性的HE4在140以下，大约98％的女性HE4水平是低于140的。HE4在卵巢癌病例中是高水平表达，显著升高者80％以上都是卵巢癌。HE4水平与疾病进展有关。如果HE4指标明显增加，说明这个疾病有进展。HE4水平还可反映化疗效果。HE4指标增加，显示疾病进展，如果指标下降了，说明疾病在缓解，治疗产生了效果。HE4也可以反映手术效果。绝大部分患者术后HE4都下降了，有一些人甚至下降90％以上。如果术后随访中发现HE4水平下降以后再上升，则提示肿瘤可能复发，所以说HE4也是肿瘤早期复发的一个检测指标。

人附睾蛋白4(HE4)是一种新的肿瘤标志物。正常生理情况下，HE4在人体中有非常低水平的表达，但在卵巢癌组织和患者血清中均高度表达，可用于卵巢癌的早期诊断、鉴别、治疗监测及预后评估。88％的卵巢癌患者都会出现HE4升高的现象。与CA125相比，HE4的敏感度更高、特异性更强，尤其是在疾病初期无症状表现的阶段。疾病早期HE4诊断的敏感度是82.7％，而CA125却仅有45.9％。与CA125仅20％的特异性相比，HE4的特异性高达99％。这意味着，临床医生对HE4的检测结果更具信心。仅仅凭借CA125的检测结果诊断卵巢癌时，10位女性中可能有8位会被误诊。HE4与CA125是相互补充的标志物，两者联合应用，敏感性可增加到92％，能将假阴性结果减少30％，大大增加了卵巢癌诊断的准确性。此外，对卵巢癌患者进行HE4定量检测，还可帮助监测疾病状态、反映治疗疗效并早期发现癌症复发，有重要的参考价值。多数卵巢癌HE4和CA125会同时升高，但有些卵巢癌只出现单一肿瘤标志物的升高。因此，两者联合使用，可避免单一应用的阴性结果造成疾病复发监测的漏诊。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于检测HE4(人附睾蛋白4)的酶联免疫试剂盒。

本发明所述的一种用于检测HE4的酶联免疫试剂盒，包括酶标板、标本稀释液、包被抗体、检测抗体、检测抗体稀释液、标准品、洗涤液、底物、终止液；其中，包被抗体为由保藏编号为CCTCC NO:C201472的杂交瘤细胞株HE4-2B8分泌的抗HE4单克隆抗体；检测抗体为已标记HRP的抗HE4多克隆抗体。