[发明专利]一种加拿大深度抽吸条件下烟草特有亚硝胺的检测方法

说明书

技术领域

本发明属于分析化学技术领域，涉及一种简单高效灵敏的烟草特有亚硝胺检测方法，具体涉及一种加拿大深度抽吸条件下烟草特有亚硝胺的检测方法。

背景技术

烟草特有亚硝胺(TSNAs)是烟草中N-亚硝胺含量最丰富的一类亚硝胺物质，只存在于烟草、烟草制品和卷烟烟气中，TSNAs的含量对正确评价吸烟对健康的危害具有重要意义。国际癌症研究署(IARC)对加拿大政府名单中有害成分的毒性评价结果表明，4-(N-甲基-N-亚硝胺)-1-(3-吡啶基)-丁酮(NNK)和N-亚硝基去甲基烟碱(NNN)纯化学成分为可疑的人体致癌成分。为了减少烟草特有亚硝胺对吸烟者和被动吸烟者健康可能的伤害，控制它们在烟草及烟草制品中的含量，已成为一项重要的课题。因此，准确测定烟草及烟草制品中的TSNAs，有助于为正确评价吸烟对健康的危害、推动低危害卷烟的研发提供可靠的依据。目前研究较为深入的TSNAs是N-亚硝基去甲基烟碱(NNN)、N-亚硝基假木贼碱(NAB)、N-亚硝基新烟草碱(NAT)和4-(N-甲基-N-亚硝胺)-1-(3-吡啶基)-丁酮(NNK)。

气相色谱法1973年就被应用于烟草特有亚硝胺的分析，目前使用的TSNAs测试方法主要依据GB/T23228-2008规定的GC-TEA法，该方法规定了卷烟主流烟气总粒相物中烟草特有亚硝胺的测定。其主要特点是每个样品需要捕集20支卷烟的总粒相物，分3次萃取，装填活化的碱性氧化铝柱，每个样品分析时间近30min，每日进样量不能超过8个。因此，存在前处理复杂、溶剂消耗量大、分析时间长、TEA检测器不能区分TSNAs和共流出的亚硝胺类化合物、死体积大、检出限高等问题，不适于大批量样品的准确测试。

毛友安等在中国专利文献CN1616962A中提到一种液相色谱-串联质谱检测烟草特有亚硝胺的方法。该方法的主要特点是捕集20支卷烟的总粒相物，使用三甲基¹³C₃标记咔啡因作内标，用柠檬酸-磷酸盐缓冲溶液和环己烷对滤片振荡共提取，N₂保护下浓缩有机相提取液，加盐酸酸化，相分离后往水相加碱溶液中和，将水相过反相键合固相萃取柱，最后浓缩。该方法因采用三甲基¹³C₃标记咔啡因作内标，故对检测的目标化合物选择性不强；有机相和水相萃取溶剂各需30mL，溶剂消耗大；用有机相和水相振荡共提取，反萃过程的泡沫形成会引起损失和误差；盐酸酸化、氢氧化钠中和、相分离、浓缩等导致前处理复杂；每个样品分析时间近30min，每日进样量受到限制。

用机器抽吸测试烟气释放量始于20世纪30年代，1936年Bradford首次提出35mL/puff的抽吸容量。1969年，在德国标准局(DIN)的倡议下成立了烟草及烟草制品国际标准化组织，该组织最早开展的工作之一就是建议使用“抽吸容量为35mL，抽吸持续时间为2s，抽吸频率为1min”的抽吸参数。

1988年，ISO提议制定全球统一的抽吸模式，并委托CORESTA开展必要的研究。CORESTA先后开展了一系列全面的研究，并于1991提出了ISO模式修订。目前世界各国广泛使用的ISO4387:2000是ISO4387:1991的修订版本，是各地区和国家制定相关政策和法规的基础，但也有个别国家和地区使用其它抽吸模式，比加拿大抽吸模式，具体参数见表1。

表1 ISO和加拿大抽吸模式参数