[发明专利]从杉皮中提取紫杉醇的方法

说明书

所属技术领域：

本发明属生物技术领域。

背景技术：

紫杉醇是存在于天然植物甜菊叶中的五环三萜类化合物，具有广泛的生物活性，且毒性极小，副作用少，成为当前国内外研究开发的热点。

本发明以甜菊叶为原料，采用“水提石沉法”提取分离紫杉醇。即以乙醇为溶剂，不加用其它有机溶剂，以自创的“YCXY-1号”除杂剂除杂，能有效去除脂类、类脂类及叶绿素等杂质，既保证了产品无有毒有害溶剂残留，提高了安全性，又简化了操作程序，降低了生产成本，有利于紫杉醇的富集和纯化，已具备批量生产高纯度紫杉醇的技术条件。 

本发明采用复合酶制剂（也可不用）对原料进行预处理，一方面促使紫杉醇与植物细胞壁脱离，从而加速紫杉醇的充分释放；另一方面能将一些脂类、类脂类等杂质水解转化为小分子水溶性物质，以利除去。经酶解处理的原料用乙醇提取，所得浸膏加“YCXY-1号”除杂剂除杂，可进一步除去脂类、黄酮类等杂质。提取物以乙醇溶解，调控其pH达到一定值，用活性炭等脱色剂进行脱色处理,经凝析分离、纯化精制、烘干得无色针状结晶紫杉醇,其纯度可达95 %以上。 

发明目的：

本发明的目的是要提供一种从植物原料中提取紫杉醇的方法，摆脱柱层析法的技术束缚，克服其需使用氯仿、正丁醇等有毒有害溶剂、工艺复杂、溶剂消耗大、成本高、安全性差、难以实现批量生产等诸多缺点，实现紫杉醇的快速、安全、高纯、批量生产。

技术方案：

将干燥的药用植物体粉碎成一定粗细的提取原料，用温水湿润后，加入适量酶（或复合酶）制剂，在室温下进行酶解处理1-2天后，再加7-10倍量热水浸提1-3小时，过滤得提取液；重复2次。将提取液浓缩至1：1体积，得浸膏。经水沉降洗涤后，加“YCXY-1号”除杂剂处理2-3次, 过滤，调节pH值，加脱色剂煮沸脱色20-120分钟，过滤，经凝析分离、纯化精制、烘干得紫杉醇。

有关效果：依照本发明的技术方案生产的紫杉醇，其纯度达95.0 %以上。 

发明的优点及效果：

① 创用生物酶制剂水解植物细胞壁，促使紫杉醇脱离，加速其释放，提高了紫杉醇的得率，加酶组紫杉醇得率明显高于未加酶组（P<0.01）。

② 发明了“水提石沉法”生产高纯度紫杉醇的新工艺。仅以纯水为溶剂，在国内率先突破了从天然药物中规模化生产紫杉醇的技术难题。 

③ 创用“YCXY-1号”高效除杂剂技术，不仅简化了操作工序，降低了生产成本，而且显著提高了分离效果和产品的安全性，实现了紫杉醇的有效分离，产品纯度达95.0 %以上，为工业生产紫杉醇创造了技术条件。