[发明专利]一种测定食用油中三甲胺含量的方法

说明书

技术领域

本发明属于食品领域，涉及一种测定三甲胺含量的方法。具体地，本发明涉及一种测定食用油中特别是植物油中三甲胺含量的方法。本发明还涉及一种从食用油中分离三甲胺的方法，以及一种测定三甲胺含量的试剂盒。

背景技术

三甲胺(Trimethylamine，简写TMA)，分子式N(CH₃)₃，属于机化合物，也是最简单的叔胺类化合物。三甲胺是气体，呈刺激性鱼和氨气味；溶于水、醇和乙醚；易燃；相对密度(d²⁰₄)0.632，沸2.9℃，凝固点－117.1℃。三甲胺的结构式如下面的式I所示：

式I

三甲胺有毒，对人的嗅觉阈浓度0.002mg/L。浓的三甲胺水溶液能引起皮肤剧烈的烧灼感并使其潮红；洗去溶液后，皮肤上仍残留点状出血，并在短时内感觉疼痛。

磷脂酰胆碱(PC)俗称卵磷脂,是生命活动基础物质,广泛存在于动植物和人的细胞膜和卵细胞中，它是胆碱的主要来源。卵磷脂的稳定性受光、温度、湿度、溶剂、pH值等的影响，易发生水解、氧化、羟基化、氢化等反应，尤其是在酸、碱、酶作用下发生水解，得到脂肪酸磷脂甘油和胆碱，而胆碱进一步水解即产生三甲胺。

目前已知的三甲胺测定方法有酸滴定法、微量扩散法、有机溶剂提取后气相色谱法、苦味酸盐比色法、顶空气相色谱法等。前两者测定的是总挥发胺，误差较大；有机溶剂提取后气相色谱法灵敏度低；苦味酸盐比色法是目前测定火腿中三甲胺的国标法，但该法要用高毒试剂甲苯，测得的是各种能与苦味酸结合的有机胺的总和，结果偏高。游离的三甲胺属于可挥发性气体，其沸点为3℃，基于基质固相微萃取的顶空气相色谱法以应用在鱼肉中三甲胺的含量，及水体中的低分子量胺类，然而此法前处理繁琐，成本较高，并且由于食用油中含有大量挥发性风味气体，采用基质固相微萃取的顶空气相色谱法会产生大量干扰，选择性不强。基于电子鼻的方法也见于报道，但总的来说还是定性识别的多，定量检测的少，而且由于敏感原理的限制，在气体识别的分辨力和气体检测的灵敏度以及抗湿度干扰等方面还有待加强。

离子色谱(ion Chromatography)是高效液相色谱的一种。离子色谱利用被分离组分与固定相之间发生离子交换的能力差异来实现分离。离子色谱的固定相一般为离子交换树脂，树脂分子结构中存在许多可以电离的活性中心，待分离组分中的离子会与这些活性中心发生离子交换，形成离子交换平衡，从而在流动相与固定相之间形成分配。固定相的固有离子与待分离组分中的离子之间相互争夺固定相中的离子交换中心，并随着流动相的运动而运动，最终实现分离。凡在溶液中能够电离的物质通常都可以用离子交换色谱法进行分离。现在它不仅适用于无机离子混合物的分离，亦可用于有机物的分离，例如氨基酸、核酸、蛋白质等生物大分子，因此应用范围较广。

目前尚需要一种有效的并且高灵敏度的测定食用油中三甲胺含量的方法。

发明内容

本发明经过深入的研究和创造性的劳动，有效地从食用油中分离出三甲胺，并得到了一种测定食用油中三甲胺含量或者浓度的方法，其灵敏度高，操作简便。由此提供了下述发明：

本发明的一个方面涉及一种从食用油中分离三甲胺的方法，包括下述步骤：

(1)称取适量食用油，并与适量的酸溶液混合；

(2)离心，弃去上层油脂，保留下层的水溶液；

(3)向水溶液层中加入适量正辛醇，然后加入适量碱至pH大于或等于11.8，迅速密封，振荡；

(4)离心，取上清液；

(5)向步骤(4)中得到的上清液加入适量酸使pH小于7，振荡，离心，吸取下层液；

(6)将步骤(5)中的下层液，进行滤膜过滤，得到通过滤膜的液体。

根据本发明任一项所述的分离三甲胺的方法，其中，步骤(1)中，优选地，混合后进行振荡；优选地，使三甲胺溶解于酸溶液中。具体地，三甲胺以离子形态溶解于酸溶液中。

根据本发明任一项所述的分离三甲胺的方法，其中，步骤(1)或(5)中所述酸为独立地选自盐酸、硫酸、磷酸、甲酸和醋酸中的任一种或者多种；优选为盐酸；更优选为0.1mol/L的盐酸。

根据本发明任一项所述的分离三甲胺的方法，其中，步骤(1)酸溶液的加入量为样品体积的0.1－2倍或0.1－1倍；优选地为0.4－0.8倍；具体地，为0.4、0.5、0.6、0.7或0.8倍；更优选地为0.5倍。