[发明专利]一种检测SCN11A基因2423位碱基突变的试剂盒

说明书

本申请是201310070553X号专利申请的分案申请。原申请号为201310070553X；原申请日为2013年3月6日；原发明名称为人类周围神经发作性疼痛致病基因及其编码蛋白。 

技术领域

本发明涉及一种人体变异的基因，即人类周围神经发作性疼痛致病基因SCN11A。本发明还涉及这种变异基因及其编码的蛋白在检测和作为治疗人类周围神经发作性疼痛疾病的药物靶点中的作用和意义。 

背景技术

疼痛是在人体受到各种伤害性刺激时所产生的感觉，是存在于人体内部的警戒与保护系统,它能引起机体产生被动性防御反应以躲避伤害刺激,对机体具有保护作用。但是过度的伤害性刺激不但会引起强烈的疼痛感觉而且还会导致机体生理功能的紊乱,甚至休克。人类疼痛分为急性疼痛和慢性疼痛，急性痛是人体免受伤害，是组织损伤的生理性预警信号。然而慢性疼痛是一种病理状态，依据疼痛病理机制，慢性疼痛可分为伤害性或炎症性疼痛(对疼痛刺激的适当反应)和神经性疼痛(由神经系统损害诱发的不适当反应)。1994国际疼痛研究会将神经性疼痛(neurogenic pain)定义为“周围或中枢神经系统原发性或继发性损害或功能障碍或短暂紊乱引起的疼痛”。神经性疼痛一直是困扰医学界的难题，发病机理不是十分清楚。周围神经性痛常涉及小直径神经纤维的信号传递，目前发现三种钠离子通道蛋白Nav1.7、Nav1.8和Nav1.9在周围神经中大量表达，2004年中国医学科学院北京协和医学院沈岩院士等研究人员从遗传上将Nav1.7钠离子通道蛋白获得性功能突变与人类疼痛关联起来，随后世界其他研究小组发现30％的小直径神经纤维痛的患者是由该蛋白获得性功能突变所造成的。2012年10月31号美国耶鲁大学医学院Waxman所领导的研究团队，在104例先天性神经痛患者中发现7个Nav1.8钠离子通道蛋白的获得性功能突变，占6.7％。然而还有许多疼痛患者的致病原因不清楚。 

发明内容

本发明的任务是提供一种变异的SCN11A基因及其编码的蛋白质。 

本发明的另一个任务是提供检测人类SCN11A基因突变的方法及试剂盒。 

本发明的又一个任务是提供这种变异的SCN11A基因在制备人类周围神经发作性疼痛基因诊断芯片中的应用。 

实现本发明的技术方案是： 

本发明提供的变异的SCN11A基因是： 

(1)该变异的SCN11A基因的第673位碱基由野生型的C变异为T，其核苷酸序列为SEQ ID NO：3所示； 

(2)该变异的SCN11A基因的第2423位碱基由野生型的C变异为G，其核苷酸序列为SEQ ID NO：5所示。 

其所编码的蛋白质的氨基酸序列分别为SEQ ID NO：4和6所示(p.R225C、p.A808G)。该蛋白质可作为治疗人类周围神经发作性疼痛的药物靶点。本发明提供的变异的人类SCN11A基因可用于制备人类周围神经发作性疼痛基因诊断芯片。 

本发明提供的检测人类SCN11A基因突变的试剂盒，含有以下21对引物中的一对或几对或全部： 

上述试剂盒还可含有Taq酶、PCR反应缓冲液和/或dNTP。 

本发明提供的体外检测SCN11A基因第673位碱基突变的试剂盒，含有以下引物物： 

F:5'CAAGCCCATGCCTTCCCTGT3' 

R:5'TTGCTTTCAAAGCTCTGAACACCC3' 

该试剂盒还可含有Taq酶、PCR反应缓冲液、dNTP、限制性内切酶Bcn I和/或Hind III。 

本发明提供的体外检测SCN11A基因第2423位碱基突变的试剂盒，含有以下引物物： 

F:5'ATCCCATTCTGCTTTACCCT3' 

R:5'CCGCCGTGAGCAAAGGAAC3'。 

该试剂盒还可含有Taq酶、PCR反应缓冲液、dNTP、限制性内切酶Bcn I和/或Hind III。