[发明专利]一种提高卡伍尔链霉菌发酵生产抗生素产量的方法有效
申请号: | 201410360101.X | 申请日: | 2014-07-24 |
公开(公告)号: | CN104152492B | 公开(公告)日: | 2017-03-29 |
发明(设计)人: | 黄永春;杨少彬;李文华;刘红梅 | 申请(专利权)人: | 农业部环境保护科研监测所 |
主分类号: | C12P1/06 | 分类号: | C12P1/06;C12R1/465 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 30019*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提高 卡伍尔链 霉菌 发酵 生产 抗生素 产量 方法 | ||
1.一种提高卡伍尔链霉菌发酵生产抗生素产量的方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤一:传种菌株斜面试管,制备原始发酵菌株;将实验室保存的卡伍尔链霉菌菌株传种在固体斜面培养基上,在28℃条件下培养4天,备用;
步骤二:制备一级种子液;将斜面菌种接种到一级液体种子培养基中,在恒温回旋式摇床上以190转/分恒温培养24h;
步骤三:制备发酵培养基:在5.0L发酵罐中,按照葡萄糖20.0g/L;蛋白胨6.0g/L;酵母粉1.5g/L;豆粕3.0g/L;聚乙烯醇5.0g/L;碳酸钙0.2g/L的量配制发酵培养基,发酵罐装液量控制在2.5L-3.0L范围内,调节发酵液初始pH=8.5-9.0范围内,121℃高温灭菌30min,降温至28℃,备用;
步骤四:接种发酵培养基:按照5%的接种量将一级液体种子接种于5.0L发酵罐中;
步骤五:发酵培养:控制发酵罐通气量在2.0-3.0L/min转速在300-400转/min,温度为28℃的条件下,发酵96h;
步骤六:下罐,检测含量:在配备有二极管阵列检测器的液相色谱上检测发酵液中抗生素含量。
2.根据权利要求1所述的一种提高卡伍尔链霉菌发酵生产抗生素产量的方法,其特征在于,步骤一中所述的固体斜面培养基配方为:葡萄糖20.0g/L;蛋白胨6.0g/L;酵母粉1.5g/L;豆粕3.0g/L;碳酸钙0.2g/L;琼脂粉20.0g/L;调节pH=8.5-9.0范围内;以3.0mL/管分装于斜面试管中,加棉塞后,于121℃高温灭菌,备用。
3.根据权利要求1所述的一种提高卡伍尔链霉菌发酵生产抗生素产量的方法,其特征在于,步骤二中所述的一级液体种子培养基配方为:葡萄糖18.0g/L;蛋白胨5.0g/L;酵母粉1.0g/L;豆粕3.0g/L;碳酸钙0.20g/L,调节pH=8.5-9.0范围内;将配制好的一级液体种子培养基按照100ml/瓶(500ml规格摇瓶)的量分装到摇瓶中,121℃高温灭菌30分钟,备用。
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