[发明专利]从聚硒植物碎米荠中提取硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸的方法

权利要求书

1.一种从聚硒植物碎米荠中提取硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸的方法，其特征在于具体步骤如下：

a.碎米荠原料预处理：将聚硒碎米荠植株晒干、粉碎，过40目筛；

b.硒代胱氨酸的提取和分离：粉碎的碎米荠用水或0.1-6mol/L的盐酸或0.1-6mol/L的NaOH溶液，在60℃-120℃下超声提取或震荡60min-180min提取，过滤，将残渣重复提取2次，合并滤液，将溶液pH值调节到6-8；

c.硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸分离条件的确定：以DL-硒代胱氨酸和DL-硒代蛋氨酸为对照品，用高效液相色谱-原子荧光联用法HPLC-HG-AFS确定分离条件为阴离子交换柱或C₁₈制备色谱柱，流动相为30mM-100mM的磷酸二氢氨水溶液pH值4-10，采用梯度洗脱，流速0.1-1.0mL/min，硒代胱氨酸保留时间为2.42±0.25min，硒代蛋氨酸保留时间为3.40±0.34min；

d.分离：水解液进样到25-45μm阴离子交换柱或C₁₈制备色谱柱分离，用30mM-100mM的磷酸二氢氨水溶液pH值4-10为洗脱液，采用中试高压制备系统，按峰收集硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸对应洗脱液，合并洗脱液；

e.透析：将洗脱液装入截留分子量100-500的纤维素酯透析袋，放入超纯水中，透去无机盐离子，透析袋内为硒代胱氨酸或硒代蛋氨酸溶液；

f.冷冻干燥：将上步骤所得冷冻干燥，得硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸精品；

e.产品纯度检测：以DL-硒代胱氨酸和DL-硒代蛋氨酸为对照品，用高效液相色谱-原子荧光联用法或高效液相-电感耦合等离子质谱法测定。

2.按照权利要求1所述的一种从聚硒植物碎米荠中提取硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸的方法，其特征在于步骤a中所述的原料聚硒碎米荠植株为其根、茎、叶。

3.按照权利要求1所述的一种从聚硒植物碎米荠中提取硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸的方法，其特征在于步骤f中所述的冷冻干燥为：先将透析得到的硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸溶液在冰箱冷冻室或冷冻干燥机的冷冻室内-20℃下冷冻成冰状，取出，放在真空干燥箱的干燥架的物料盘中，盖好有机玻璃罩，打开冷冻干燥箱的真空泵和冷阱，在-56℃、10Pa以下干燥24h以上，再将透析袋内粉末刮下，得硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸精品。