[发明专利]重组灵芝免疫调节蛋白（rLZ-8）在调节血脂中脂蛋白含量的应用

说明书

技术领域

本发明涉及的重组灵芝免疫调节蛋白是由基因重组技术，以巴斯德毕赤酵母为表达载体，深度发酵表达的重组灵芝免疫调节蛋白在调节血脂中脂蛋白含量的应用，重点涉及重组灵芝免疫调节蛋白能够有效升高高密度脂蛋白胆固醇含量及有效降低低密度脂蛋白含量，属于生物医药工程领域。

背景技术

高密度脂蛋白胆固醇（High density lipoprotein-cholesterol，HDL-C），主要是由肝脏和小肠合成。它是由载脂蛋白、磷脂、胆固醇和少量脂肪酸组成。HDL-C主要功能为，将蓄积于末梢组织的游离胆固醇与血液循环中脂蛋白或与某些大分子结合而运送到各组织细胞，近来，众多的科学研究证明，由于HDL-C颗粒较小，结构致密，能自由进出动脉壁，可以摄取血管壁内膜底层沉浸下来的低密度脂蛋白、胆固醇、甘油三酯等有害物质，且不向组织释放胆固醇，具有将组织中胆固醇转移出来的功能，所以它被认为是抗动脉粥样硬化的保护因子，因此，高密度脂蛋白具有“抗动脉粥样硬化性脂蛋白”的美称。具有明确的抗动脉粥样硬化的作用，可以将动脉粥样硬化血管壁内的胆固醇“吸出”，并运输到肝脏进行代谢清除。上述过程实际上是胆固醇逆转(RCT)，RCT促进组织细胞内胆固醇的清除，维持细胞内胆固醇量的相对衡定，HDL-C运载周围组织中的胆固醇，再转化为胆汁酸或直接通过胆汁从肠道排出，动脉造影证明高密度脂蛋白胆固醇含量与动脉管腔狭窄程度呈显著的负相关。所以高密度脂蛋白是一种抗动脉粥样硬化的血浆脂蛋白，是冠心病的保护因子，俗称“血管清道夫”。 从而限制动脉粥样硬化的发生发展，起到抗动脉粥样硬化作用。

低密度脂蛋白胆固醇（Low density lipoprotein-cholesterol，LDL-C）：一种密度较低(1.019～1.063 g/cm3)的血浆脂蛋白，约含25%蛋白质与49%胆固醇及胆固醇酯。其胆固醇主要来自从CE转运的高密度脂蛋白中的胆固醇，低密度脂蛋白是富含胆固醇的脂蛋白，主要作用是将胆固醇运送到外周血液，是动脉粥样硬化的危险因素之一，被认为是动脉粥样硬化的诱因。如果血液中低密度脂蛋白胆固醇浓度升高，它将沉积于心脑等部位血管的动脉壁内，逐渐形成动脉粥样硬化性斑块，阻塞相应的血管，LDL-C水平如果超出正常范围时就会使心脏的危险性增加。因此LDL-C常被称为是“坏”胆固醇，降低LDL-C水平，则预示可以降低冠心病的危险。

动脉粥样硬化是冠心病，心绞痛，心肌梗死，脑中风，周围血管性疾病等心血管疾病的根源，严重威胁人类健康。动脉粥样硬化的病程较长，从早期到晚期可长达30年之久，是慢性经过疾病，动脉的主要病理改变是弹性减弱，硬度脆性增加，官腔变窄到晚期的闭塞停滞血供，进而形成最严重的动脉瘤。

动脉粥样硬化的四个主要病理过程为：（1）低密度脂蛋白在易损区域动脉内皮下间质沉积。（2）单核巨噬细胞粘附于内皮细胞表面。（3）巨噬细胞进入内膜层增殖，并吞噬氧化性LDL-C转化成泡沫细胞。（4）泡沫细胞死亡并释放出脂质，形成坏死中心。（5）平滑肌细胞迁移、增生聚集，并分泌纤维样物质，使形成的斑块增大。

本发明中所使用的重组灵芝免疫调节蛋白(recombinant Ganoderma lucidum immunoregulatory protein，rLZ-8)，是应用基因工程方法得到的具有高纯度和稳定生物活性的rLZ-8样品。灵芝免疫调节蛋白的主要功能在于它可以促进末梢淋巴细胞和脾脏细胞的生物活性，诱导动物和人体的巨噬细胞分泌多种细胞因子进而防御及消除病原体的侵害，维护机体的健康。

发明内容

本发明重点提供重组灵芝免疫调节蛋白在调节血脂中脂蛋白含量的应用，本发明目的之一是提供重组灵芝免疫调节蛋白的一种新用途，即在调节组织中脂蛋白含量以及治疗动脉粥样硬化的应用。

本发明所述的重组灵芝免疫调节蛋白是使用巴斯德毕赤酵母表达的重组灵芝免疫调节蛋白，不论是从何种途径提取或得到的灵芝免疫调节蛋白，其主要成分相同，基本结构相同，都具有相同的药理功效，即都可以用于调节组织中脂蛋白含量以及治疗动脉粥样硬化。

具体发明内容如下：本发明采用雄性Wistar大鼠(体重230±20g) 建立了高脂蛋白模型，共72只，随机分为6组，每组12只；实验分组：正常对照组，模型对照组， rLZ-8低剂量组、rLZ-8中剂量组、rLZ-8高剂量组，辛伐他汀组（SV，1.8mg/kg）。动物分笼饲养，自由饮水，正常组喂饲正常饲料，模型组、rLZ-8各给药组以及辛伐他汀组喂食高脂饲料，造模时间为6周。每日观察大鼠的食欲、体重、行为、状态、及死亡情况。