[发明专利]一种诱导雷州马尾藻离体生殖托同步成熟的育苗方法

权利要求书

1.一种诱导雷州马尾藻离体生殖托同步成熟的育苗方法，其特征在于：包括如下步骤：

（1）种藻的采集和运输:在雷州马尾藻尚不成熟的冬季或春季，选择大潮低潮期间采集种藻，装入整理箱，采用湿运法运输至目的地；

（2）种藻的暂养：运回的雷州马尾藻种藻，先将雌、雄藻体分别在用孔径50 μm滤网过滤的海水中暂养；

（3）种藻的预处理：用经过50 μm滤网过滤的海水清洗藻体表面，除去杂藻和附着物；

（4）生殖托的分离：将预处理后的种藻先用消毒刀片分别切下雌、雄生殖托枝，并用洁净的毛笔刷除生殖托表面的附着物，再用消毒刀片将生殖托分离成单个或单丛（3-5个纯生殖托）；

（5）诱导成熟：于光照培养箱中将离体的雌雄生殖托1:1混合，静置培养，光周期设定为12L:12D，每天定时更换一次培养液，并定时摇动培养液3次，培养液采用50 μm滤网过滤、煮沸冷却后的海水，每次摇动0.5分钟，培养6-20天，雌、雄生殖托成熟、排卵、排精；

（6）育苗：收集步骤（5）中自然脱落、刚长出乳突状假根的受精卵，静置培养，每天定时更换一次培养液，并定时摇动培养液3次，每次摇动0.5分钟，培养18天，获得幼苗。

2.根据权利要求1所述的一种诱导雷州马尾藻离体生殖托同步成熟的育苗方法，其特征在于：步骤（1）所述的种藻发育健壮、杂藻少、侧枝多、成熟度较一致，并且雄生殖托长7-15mm，雌生殖托长4-5mm。

3.根据权利要求1所述的一种诱导雷州马尾藻离体生殖托同步成熟的育苗方法，其特征在于：步骤（2）所述的暂养条件是指水温20-22℃，盐度26-28，光照强度介于0-60 μmol·m^-2s^-1之间，充气使水呈沸腾、翻滚状，暂养时间为从运回实验室直至进行种藻预处理，3-7天。

4.根据权利要求1所述的一种诱导雷州马尾藻离体生殖托同步成熟的育苗方法，其特征在于：步骤（5）所述的静置培养是指在温度23℃~30℃、光照强度60~160 μmol·m^-2s^-1、海水盐度26~34条件下培养。

5.根据权利要求1所述的一种诱导雷州马尾藻离体生殖托同步成熟的育苗方法，其特征在于：步骤（5）所述的每天定时更换一次培养液的时间为早上9-10点；每天定时摇动培养液的时间为11∶30、15∶30、19∶30；雌、雄生殖托成熟、排精、排卵率达100%，排卵量达13个/mm²，受精率达100%。

6.根据权利要求1所述的一种诱导雷州马尾藻离体生殖托同步成熟的育苗方法，其特征在于：步骤（6）所述的每天定时更换一次培养液的时间为早上9-10点；每天定时摇动培养液的时间为11∶30、15∶30、19∶30；培养条件是指温度20-30℃，盐度26-34，光照强度40-120 μmol·m^-2s^-1，光周期12L:12D，幼苗体长达7.1-8.4mm，具有1-3个藻叶。