[发明专利]一种用作结合对的特异性结合反应培养基的水溶液

说明书

本申请是申请日为2004年2月26日、申请号为No.200480042127.4、发明名称为“一种用作结合对的特异性结合反应培养基的水溶液”的中国发明专利申请的分案申请。

本发明涉及用作结合对的特异性结合反应培养基的水溶液。

发明背景

公知使用一种或多种抗体在一种试样中检测试验物质(分析物)的免疫测定技术。免疫测定技术方法的发展增强了该试验的敏感性。尽管在近些年来有所发展，但仍然希望消除非特异性的结合反应、交叉反应以及基质之中存在的化合物的影响。

免疫测定法取决于结合成员对的第一结合成员(如一种抗原或配体)与结合成员对的第二结合成员(如一种抗体或受体)特异性结合的能力。为了测定这种结合的延续，用可检测部分标记含有这种结合成员的一方的共轭物。这种结合成员对可以是一种抗原和针对该抗原的抗体。

免疫测定法可以以竞争性的免疫测定法形式或以夹心免疫测定法形式进行。在竞争性的免疫测定法形式中抗原可以被固定到固相材料上，而结合到固相材料上的可检测部分的数量能够被检出、计量并将其与试样中存在的抗体的数量相关联。固相材料的实例包括珠子、颗粒、微粒等等。在夹心免疫测定法形式中，将含有例如一种抗体的试样与一种蛋白质例如抗原相接触。所述抗原被固定在固相材料上。固相材料的实例包括珠子、颗粒、微粒等等。所述固相材料通常用一种已被可检测部分标记的第二抗原或抗体生成。然后分别在所述固相材料上第二抗原或抗体分别与相应抗体或抗原结合，在一个或多个洗涤步骤以去掉未结合的物质之后，加入一种指示剂物质例如显色物质，使其与可检测部分反应，产生可检测信号，如颜色变化。然后检出该颜色变化，计量并将其与试样之中存在的抗体数量相关联。此外应注意还需要各种稀释剂和缓冲液用于优化处理微粒、抗原、共轭物及参与化学反应的其他试验组分。

为了在免疫测定法中获得最佳结果，用于结合伙伴之间结合反应(例如抗体和抗原反应或配体和受体生成复合体)的溶液必须提供一种培养基以优化抗体结合抗原的能力，或必须提供一种培养基以优化配体结合受体的能力，同时强有力的降低甚至防止非特异性相互作用、低亲合性结合和基质效应，以免生成错误信号。

为了消除非特异性相互作用和交叉反应，有人在结合反应之后将洗涤剂加入洗涤步骤所用的缓冲液中以去除非特异性结合。

对于免疫测定法，像western印记分析、酶联免疫吸附试验(ELISA)等，使用含有补充有牛血清白蛋白和0.01到0.05(v/v)20的磷酸盐缓冲盐水的溶液作为培养基，用于结合伙伴(例如抗体和抗原)之间的结合反应。但是常常发现用现有技术的这种缓冲液不能避免非特异性或低亲合性结合、交叉反应和基质效应。例如，当研究一种涉及多元分析物检测的CRP试验时，由于应用多元抗体而带来的交叉反应和基质效应看来已成为一个问题，其不能通过利用常规的免疫测定缓冲液解决。

因此本发明的目的是提供一种溶液，作为用于结合成员对的特异性结合反应的培养基使用，其中强有力的降低或甚至防止非特异性结合、低亲合性结合、交叉反应和基质效应。此外，本发明的目的是提供一种免疫测定方法，其中非特异性和低亲合性结合、交叉反应和基质效应被降低或防止。

发明概述

本发明的目的是通过使用一种水溶液作为用于结合成员对的特异性结合反应的培养基而实现的，其中第一结合成员识别其互补的第二结合成员，该溶液含有

a)控制pH的一种缓冲液；

b)选自下组的化合物A：

-由通式I R¹-[[CR²R³]_p-O]_q-R⁴定义的化合物，其中R¹是氢或羟基，各单元中R²独立地是氢或羟基，R³是氢、甲基、乙基，R⁴是氢或烷基，p是2到10的一个整数，q是1到100的一个整数，附带条件是该化合物至少携带两个羟基；

-多元醇；

-糖类；

c)非离子洗涤剂。

在化合物A的通式I中，如果R⁴是氢，相邻的残基R²也是氢。如果R¹是羟基，相邻的残基R²是氢。在一个优选具体实施方式中，化合物A的分子式中的q是从1到50的一个整数，更优选从1到30。