[发明专利]一种铂纳米笼免疫探针及其制备方法和在制备电化学免疫传感器中的应用

权利要求书

1.一种立方体形的铂纳米笼状颗粒，其特征在于通过以下方法制备得到：

(1)将十六烷基三甲基溴化铵的水溶液加热至80-120℃后，加入氯钯酸水溶液，然后加入抗坏血酸，反应10-60min后，离心，沉淀用去离子水清洗，然后分散在去离子水中；

(2)将步骤(1)得到的溶液和十六烷基三甲基溴化铵的水溶液混合，加热至80-100℃，将氯铂酸钾水溶液加入其中，搅拌10-20小时，产物离心，沉淀去离子水清洗，即得。

2.如权利要求1所述的铂纳米笼状颗粒，其特征在于：步骤(1)所述的十六烷基三甲基溴化铵的水溶液的浓度为10-25mM，所加入的氯钯酸溶液的浓度为1-10mM，体积为十六烷基三甲基溴化铵的水溶液体积的1/20-1/30，所加入的抗坏血酸与氯钯酸的摩尔比为1:0.1-1。

3.如权利要求1所述的铂纳米笼状颗粒，其特征在于：步骤(2)所加入的十六烷基三甲基溴化铵的水溶液的浓度为6-25mM，所加入的量为步骤(1)得到的溶液体积的2-5倍，所加入的氯铂酸钾水溶液的浓度为0.1-10mM，所加入的量为步骤(1)得到的溶液体积的1/5-1/2。

4.权利要求1-3任一项所述的铂纳米笼状颗粒在制备铂纳米笼免疫探针中的应用。

5.一种铂纳米笼免疫探针，其特征在于通过以下方法制备得到：

(1)将权利要求1-3任一项所述的铂纳米笼状颗粒用磷酸缓冲液洗涤、分散；

(2)室温下，将铂纳米笼状颗粒与抗体混合，离心除去上清液；

(3)沉淀用磷酸缓冲液洗涤、分散后与电信号物质混合，离心除去上清液；

(4)沉淀用磷酸缓冲液洗涤，得到的铂纳米笼免疫探针分散到磷酸缓冲液中，于4℃储存。

6.如权利要求5所述的铂纳米笼免疫探针，其特征在于：步骤(1)、(2)或(4)中所用磷酸缓冲液为0.1M，pH值为5.0-8.0，且含有0.1M KCl的磷酸缓冲液。

7.如权利要求5所述的铂纳米笼免疫探针，其特征在于：所述的电信号物质包括硫堇和巯基二茂铁。

8.权利要求5-7任一项所述的铂纳米笼免疫探针在制备电化学免疫传感器中的应用。

9.如权利要求8所述的应用，其特征在于：按照权利要求7所述的方法分别制备偶联两种或多种抗体及峰电位能区分的两种或多种电信号物质的铂纳米笼免疫探针，将制得的两种或多种铂纳米笼探针固定在电极的表面，得到能够同时对两种或多种标记物进行检测的电化学免疫传感器。

10.一种能够同时实现对肿瘤标志物CEA和AFP进行检测的电化学免疫传感器，其特征在于通过以下方法制备得到：

(1)将权利要求1-3任一项所述的铂纳米笼状颗粒用磷酸缓冲液洗涤、分散；

(2)室温下，将铂纳米笼状颗粒分别与CEA和AFP抗体混合，离心除去上清液；

(3)沉淀用PBS洗涤、分散后与分别与硫堇和巯基二茂铁混合，离心除去上清液；

(4)沉淀用PBS洗涤，得到的铂纳米笼免疫探针分散到磷酸缓冲液中，制得的铂纳米笼免疫探针于4℃储存；

(5)通过免疫反应将制得的两种铂纳米笼探针固定在电极的表面，即得。

11.权利要求10所述的电化学免疫传感器在制备对肿瘤标志物CEA和AFP进行同时检测的试剂中的应用。