[发明专利]多叶越南槐中总生物碱的提取方法、检测方法及其应用

说明书

技术领域

本发明属于药液提取技术领域，具体涉及一种多叶越南槐中总生物碱的提取方法、检测方法及其应用。

背景技术

多叶越南槐Sophora tonkinensis Gagnep.var.polyphyllaS. Z.Huang et Z.C.Zhou为豆科槐属植物，与常用中药材山豆根[学名：越南槐Sophora tonkinensis Gagnep]是同科同属同种的根，是越南槐的一个变种。生长于石山区，分布于广西、广东、云南、贵州和江西等省，在广西主要分布于红水河流域，如都安、马山、忻城、武鸣等地。其性寒，味苦，具有清热解毒、消肿利咽之功效，常用于火毒蕴结，咽喉肿痛，齿龈肿痛，肺热咳嗽，肝炎等疾患的治疗。

有关多叶越南槐药物成分目前有了一些研究：

1、卢文杰 、牙启康在《广西科学》2011年第四期发表了“多叶越南槐脂溶性成分研究” 的文章，采用索氏提取法提取多叶越南槐（Sophora tonkinensis Gagnep.var.polyphyllaS.Z.Huang et Z.C.Zhou）的脂溶性成分,甲酯化后,用气相色谱-质谱联用（GC-MS）进行分析,计算机检索结合人工解析进行成分分析和鉴定,共分离得到41个峰,鉴定了其中32种成分。多叶越南槐脂溶性成分主要含长链脂肪酸。所有成分均首次在该植物中鉴定。

2、卢文杰、陆国寿、谭晓、陈家源、黄周锋在《中国实验方剂学杂志》2014年第20卷第8期发表了“多叶越南槐生物碱类成分的研究”的文章，采用Sephadex LH-20柱色谱、硅胶柱色谱、重结晶等方法分离和纯化多叶越南槐的生物碱成分，综合运用红外光谱、质谱、核磁共振等技术和理化方法进行分析，并确定分离得到的生物碱结构。结果：根据理化性质及波谱数据，鉴定了各化合物的结构分别是：槐果碱，苦参碱，槐花醇，9α-羟基苦参碱，12α-羟基槐果碱，氧化槐果碱，氧化苦参碱，金雀花碱。结论：化合物1～8均为首次从多叶越南槐中分离得到。

多叶越南槐与山豆根具有相同的药用功效，广西民间常把多叶越南槐当作山豆根药材来使用，《广西中药材标准，1990版》也将多叶越南槐作为山豆根药材的植物来源之一收载。据分析，多叶越南槐与山豆根一样含有苦参碱，槐果碱，槐花醇，9α–羟基苦参碱，12α-羟基槐果碱，氧化苦参碱，氧化槐果碱，金雀花碱等多种生物碱成分。目前市场上山豆根面临日益枯竭的现状，因此，对多叶越南槐中总生物碱进行提取开发，探索多叶越南槐药材能否作为山豆根的代用品，为资源利用和临床应用提供科学依据，显得尤为重要。

发明内容

本发明的目的是针对目前市场山豆根资源逐渐减少的问题，提供一种多叶越南槐中总生物碱的提取方法、检测方法及其应用，以此探索多叶越南槐药材能否作为山豆根的代用品，为资源利用和临床应用提供科学依据。

本发明的目的是通过如下技术方案实现的：

本发明多叶越南槐中总生物碱的提取方法分为两种：

第一种方法为：将多叶越南槐药材用70-95%乙醇加热回流提取得到流浸膏，经过加水混悬和调酸处理后用氯仿萃取，最终得到总生物碱。

具体步骤为：（1）将多叶越南槐药材粉碎成20-80目粗粉，用70-95%乙醇在80-90℃下回流提取3-5次，每次1-3小时，趁热过滤，回收溶剂，得60-70℃下相对密度为1.10-1.20的流浸膏；（2）将流浸膏加水混悬，滴加浓硫酸至pH值为3；（3）用氯仿萃取至氯仿颜色变浅，酸水层加碳酸钾至pH值为11，用氯仿萃取至氯仿液蒸干无生物碱反应，回收氯仿得氯仿提取物，即得总生物碱。

第二种方法为：先将多叶越南槐药材渗漉提取，经732阳离子交换树脂洗脱提取，最后对树脂进行氯仿洗脱处理得到总生物碱。

具体步骤为：（1）将多叶越南槐药材粉碎成20-80目粗粉，用多叶越南槐药材质量的8-20倍的1%盐酸水溶液渗漉提取1-7天，收集渗漉液；（2）渗漉液通过预先处理好的732阳离子交换树脂柱，用水洗脱树脂柱至水液无色；（3）将树脂倒入敞开的器皿中，晾干，用氨水捏溶，用氯仿回流提取2-5次，至氯仿提取液蒸干检查无生物碱反应，回收氯仿提取液得氯仿提取物，即得总生物碱。