[发明专利]一种高效液相色谱法分离测定依折麦布及有关物质的方法

说明书

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种高效液相色谱法分离测定依折麦布及有关物质的方法。该方法在高效液相色谱法分析过程中采用的色谱柱是以苯基硅烷键合硅胶为填料，以溶液A和有机溶剂B按一定比例混合为流动相进行洗脱；所述的溶液A为酸的水溶液、乙腈和甲醇的混合溶液。该方法对依折麦布6种有关物质均能适用，可以同时对其中的一种或多种有关物质进行分离检测，与现有技术相比，提高了分离检测的效率；且利用本发明的方法检测依折麦布碱降解杂质，能更准确、更有效地将有关物质6和其他降解杂质有效分离开，能更精准的确保依折麦布原料及其制剂的质量可控，并最终确定产品的安全有效。

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种采用高效液相色谱法分离和测定依折麦布及有关物质的方法。

背景技术

依折麦布是降胆固醇药物，可单独或与HMG-CoA还原酶抑制剂（他汀类）联合应用于治疗原发性（杂合子家族性或非家族性）高胆固醇血症，可降低总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白、非高密度脂蛋白胆固醇；还可用于纯合子家族性高胆固醇血症的治疗。分子式为C₂₄H₂₁F₂NO₃，化学名为1-(4-氟苯基)-3(R)-[3-(4-氟苯基)-3(S)-羟丙基]- 4(S)-(4-羟苯基)-2-吖丁啶(氮杂环丁烷)酮，其化学结构式如下：

在依折麦布合成过程中，会产生一些相关的杂质物质如生产过程中产生的副产物或中间体或降解产物等，这些杂质可能会由于去除不完全而影响药物的纯度和质量，目前，已知的杂质物质有6种，分别为：有关物质1（副产物杂质）、有关物质2（副产物杂质）、有关物质3（中间体杂质）、有关物质4（中间体杂质）、有关物质5（既是副产物又是降解杂质）和有关物质6（降解杂质），这6种杂质物质的结构式如下：

对于依折麦布合成工艺中引入的上述副产物和中间体，在依折麦布原料药中需要进行质量控制，而依折麦布相关的降解杂质需要在依折麦布原料药及制剂中进行质量控制，因此，实现依折麦布及有关物质的分离和测定对依折麦布原料及制剂的生产和贮存具有重要的意义。

目前对于依折麦布有关物质的分析检测方法有进口注册标准（JX20070201），采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.05mol/L磷酸二氢钾溶液：乙腈：四氢呋喃（65：25：10）为流动相进行等度洗脱，流速为1.0ml/min，检测波长为232nm，柱温为25℃，进样体积为30μl，检测时间为主峰保留时间的2倍，但是，该标准的方法对上述的有关物质3和有关物质4不能检出；在碱降解试验中，有关物质6和其他降解杂质不能分离。

另外，申请号为201210337025.1的发明专利中公开了一种用液相色谱法分离测定依折麦布有关物质的方法，该方法以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以一定比例的酸性水溶液-有机相为流动相，定量测定依折麦布及其有关物质的含量，酸性水溶液的酸为磷酸、碳酸、甲酸、乙酸中的一种，有机相为甲醇、乙腈、丙醇、异丙醇中的一种；申请号为201410015689.5的发明专利公开了一种用液相色谱法分离测定依折麦布中间体有关物质化学纯度的方法，该方法以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以一定比例的磷酸水溶液-有机相为流动相，定量测定依折麦布中间体及其有关物质的含量，有机相为甲醇、乙腈、丙醇、异丙醇中的一种；但是同样，采用申请号为201210337025.1的发明专利中公开的方法和申请号为201410015689.5的发明专利中公开的方法均不能完全分离检测上述杂质，说明目前现有技术中公开的方法均不能同时适用于上述的6种杂质的检测。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种高效液相色谱法分离测定依折麦布及有关物质的方法，该方法适用于上述6种有关物质的分离和检测，可同时实现上述6种有关物质的分离和检测，提高了分离检测的效率。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：