[发明专利]一种干蚕蛹虫草及其培养方法有效
申请号: | 201410375894.2 | 申请日: | 2014-08-01 |
公开(公告)号: | CN104164367B | 公开(公告)日: | 2017-02-08 |
发明(设计)人: | 李国军;范志勇;张群喜 | 申请(专利权)人: | 沁阳市西向食用菌研究所 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14 |
代理公司: | 郑州大通专利商标代理有限公司41111 | 代理人: | 陈大通 |
地址: | 454550 *** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 蚕蛹 虫草 及其 培养 方法 | ||
技术领域
本发明涉及虫草技术领域,具体涉及一种干蚕蛹虫草及其培养方法。
背景技术
目前,国内外人工生产虫草主要是采用活体蚕蛹生产蛹虫草,具体方法是:在无菌条件下,将活体蚕蛹逐个注射菌种。采用此方法生产蛹虫草,成功率低,一般≤60%,工作效率低,每人每小时注射≤110个,生产成本高,每公斤蛹虫草≥2500元,因此,很难实施规模化生产。
中国专利CN103210787B专利公开了一种保藏编号为CGMCC NO.6808的蛹虫草菌株(Cordyceps militaris)沁虫1号、蛋化虫草及其培养方法与应用。以所述蛹虫草菌株沁虫1号感染寄主禽蛋,经人工培育转化可形成蛋与草的复合体—蛋化虫草。该项发明筛选培育出了育性稳定、适应性好的蛹虫草菌株沁虫1号,以其感染寄主禽蛋,人工培育出了一种新式的虫草品种。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种干蚕蛹虫草,以蛹虫草菌株(Cordyceps militaris)沁虫1号感染干蚕蛹,经人工培育转化而成。
本发明的目的还在于提供一种干蚕蛹虫草的培养方法。
为解决上述技术问题,本发明采用的技术方案是:
一种干蚕蛹虫草,以蛹虫草菌株沁虫1号感染干蚕蛹,经人工培育转化而成的干蚕蛹与草的复合体;蛹虫草菌株沁虫1号保藏编号为CGMCC NO.6808。
上述的干蚕蛹虫草的培养方法,包括以下步骤:
(1)配制培养液:将葡萄糖10~13 g,硫酸镁1~2 g,磷酸二氢钾3~5 g,蛋白胨4~7 g,维生素B1 0.05~0.07 g和蒸馏水1800~ 2000 mL混合,加热至100~120 ℃,保持1~2 min,制成培养液;
(2)干蚕蛹处理:选择符合食用标准的干蚕蛹,装入玻璃瓶中,每瓶20~22 g干蚕蛹,然后再加入18~20 mL步骤(1)培养液;封口,灭菌处理;灭菌温度120~150 ℃,时间60~80 min;
(3)液体菌种的培育:
a. 取蔗糖25~35 g,蛋白胨7~12 g,酵母膏1~3 g,磷酸二氢钾1~1.2 g,硫酸镁0.5~1.0 g,干蚕蛹粉8~12 g,琼脂20~25 g与蒸馏水800~1200 mL混合,加热至沸腾,文火保持10~15 min,趁热装管、封口、灭菌、摆斜面,冷却后凝固即成母种培养基,培养基体积为试管体积的1/4~1/3,再向该培养基斜面上接种蛹虫草菌株沁虫1号(保藏编号CGMCC NO.6808),置18~23 ℃环境中暗光活化培养8~10天,当菌丝发满斜面培养基表面,即成干蚕蛹虫草母种;
b. 取葡萄糖18~20 g、蛋白胨3~5 g、酵母膏5~7 g、硫酸镁0.5~0.7 g,磷酸二氢钾0.5~0.7 g、琼脂0.01~0.05 g、维生素B1 0.07~0.09 g,植物食用油0.5~1.0 mL和蒸馏水800~1200 mL混合,加热至100~120 ℃,保持1~2 min,制成菌种培养液;
c. 在无菌环境下,在1000 mL烧瓶中装入步骤b所述的菌种培养液,填充量为700~800 mL,接入步骤a干蚕蛹虫草母种,在18~23 ℃环境中静止培养70~80 h,再通气培养70~80 h,当小米粒状菌球充满培养液时停止通气,经检验无杂菌、细菌感染后,即成干蚕蛹虫草液体菌种;
(4)接种:在无菌条件下,将步骤(3)液体菌种接种到步骤(2)处理后的蚕蛹上面,接种量为干蚕蛹:菌种=(20~22) g:(4~6) mL,轻摇玻璃瓶3~5次,封口;
(5)染菌期培养:接种后置于18~22 ℃、空气湿度50~55%的黑暗环境中培养8~10天,待菌丝发满即完成染菌期;
(6)转色期培养:光照150~200 lux、温度20~23 ℃、空气湿度60~65%下培养6~8天,待菌丝由白色转为橘黄色时转色完成;
(7)出草期培养:
①从原基形成到草长至2 cm为第一阶段,时间为14~16天,培养条件为自然光照、温度18~24 ℃、空气湿度65~75%;
②草长至2 cm以上直到干蚕蛹虫草完全成熟为第二阶段,时间为20~26天,培养条件为自然光照、温度20~25 ℃、空气湿度75~85%,当子座顶端膨大并出现龟背条纹、色泽变暗、表面出现粉末状物时采收,即为干蚕蛹虫草。
根据上述的干蚕蛹虫草的培养方法,步骤(3)所述的干蚕蛹粉粒度为200~500目。
本发明具有积极有益的效果:
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